伊势久生物 邻苯二甲醛试剂生化检测 生化研究 科研用
价格 | ¥150.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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纯度 | · | 规格 | 100ml |
品牌 | 伊势久生物 | 用途范围 | 生化研究 |
包装类型 | 瓶 | 保质期 | 12个月 |
产品名称 | 邻苯二甲醛试剂 | 类别 | 生化检测 |
外观性状 | 液体 | 货号 | KB045 |
邻苯二甲醛试剂
简介:
胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇,是一种环戊烷多氢菲的衍生物,分子式C27H46O,分子量为3860.65。胆固醇广泛存在于动物体内,其中脑、神经组织最丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。
邻苯二甲醛试剂属于总胆固醇检测(邻苯二甲醛比色法)的核心成分之一,检测原理是胆固醇及其脂,在强酸存在下与邻苯二甲醛反应,产生紫红色化合物,该化合物在550nm波长处有最大吸收峰,分光光度计在550nm处进行比色测定,胆固醇含量在4mg/ml之内与吸光度呈良好线性关系。本试剂用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。该检测优点是:1、操作简便;2、灵敏;3、稳定;4、无需将胆固醇单独抽提出来或去除样品中的蛋白质。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
产品名称
|
KB045-100ml
|
Storage
|
试剂(A):邻苯二甲醛粉剂
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100mg
|
4℃,避光
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试剂(B):邻苯二甲醛稀释液
|
100ml
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RT
|
说明书
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一份
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保存条件:
4℃,避光保存,12个月有效。
操作步骤(仅供参考):
1、样本处理:
①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。
②细胞样本:
a、取适量的细胞(一般推荐106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
b、用PBS或生理盐水清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次。亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心,待用。亦可用1~2%TritonX-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心,待用。
③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水=1:4的比例,加入生理盐水,冰浴条件下手动或机械匀浆。2500~3000g离心10min,取上清待用。
2、配制胆固醇标准工作液。
3、配制邻苯二甲醛工作液:取1瓶(10mg)邻苯二甲醛粉剂的准确加入邻苯二甲醛稀释液10ml,充分混匀,即为邻苯二甲醛工作液。4℃避光保存,2周有效。
4、配制强酸工作液:取适量的TC assay buffer和浓硫酸等量混合,即为强酸工作液。注意:本试剂盒不提供浓硫酸,需用户自备。二者混合时,一定小心操作,以免误伤自己。配制好的强酸工作液工作液中的硫酸含量应准确,否则有可能影响显色效果。
5、分光光度计胆固醇测定操作:
①按下表依次加入试剂:
加入试剂(ml)
|
空白管
|
标准管
|
待测管
|
蒸馏水
|
0.006
|
||
系列胆固醇标准工作液
|
0.006
|
||
待测血清或其他样本
|
0.006
|
||
TC assay buffer
|
0.24
|
0.24
|
0.24
|
邻苯二甲醛工作液
|
0.12
|
0.12
|
0.12
|
强酸工作液
|
2.4
|
2.4
|
2.4
|
②充分混匀,静置10min。以分光光度计,1cm比色杯测定550m吸光度,以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
计算:以吸光度为纵坐标,以胆固醇浓度为横坐标,作标准曲线。对照标准曲线即知待测样本的浓度。
注意事项:
1、上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、本法可直接用于检测脑脊液中的TC含量,也可直接检测尿液中的TC含量。
3、待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
4、如果样本TC浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
5、本产品仅由于科研,严禁他用。
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