蘑菇假单胞菌保存方法

菌种保藏的方法 斜面保藏法和穿刺保藏法 沙土管干燥保藏法：

真空冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 悬液保藏法 低温保藏法 一种良好的菌种保藏方法，首先应保持原菌优良性状长期 稳定，同时还应该考虑方法的通用性、操作的简便性和设备 的普及性。具体的方法很多，现把多种方法按类排列后作一 综合性表解，以便读后有一全面了解。

使用说明书：

●复苏菌种前需先准备好适用于该菌生长的固体、液体培养基和培养设备，以形成无菌的操作环境。

●蘑菇假单胞菌保存方法开启之前，先用75%酒精棉消毒试管表面，按铝盖上的箭头方向打开瓶盖和胶塞，加入0.3ml左右的配套液体培养基，用无菌滴管反复吹吸，将冻干菌种溶解为悬液，然后用无菌滴管或接种环移至斜面、平板或液体培养基，并连同剩余菌悬液的试管一起放置于36℃培养箱中进行培养。

●次日观察菌种的生长情况，如未生长，应继续培养24h，或吸取培养之后的试管剩余菌悬液再次接种培养，培养24小时观察。

●菌株为一次性使用品，暂不开启的菌种应在4℃环境下保存。

●复苏后的菌种在传1-2代以后使用，建议菌种使用5代后弃用。

★综合微生物的培养方法，包括以下步骤：

（1）前期准备：（A）灭菌处理；（B）制备Biolite水；（C）检查设备和材料；

（2）按比例配制培养材料；

（3）导入曝气，进行繁殖培养；

（4）取液观察；（a）取液；（b）稀释菌液；（c）平板培养；

（5）分离并检测；

（6）取液储存；通过该综合微生物培养方法简单可操作性强，培养的综合微生物均在3代以内，菌类稳定不发生突变，且繁殖快速。

实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 

4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

菌种的培养：

菌种菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

Aspergillus nidulans构巢曲霉LAMP试剂盒

Aspergillus ochraceus赭曲霉LAMP试剂盒

Aspergillus parasiticus寄生曲霉LAMP试剂盒

Aspergillus spp. 曲霉属通用LAMP试剂盒

Astrovirus(AV)星状病毒RT-LAMP试剂盒

Aujeszky's Disease Virus(ADV)奥叶兹基氏病病毒LAMP试剂盒

Avian Adenovirus禽腺病毒LAMP试剂盒

Avian Encephalomyelitis Virus(AEV)禽脑脊髓炎病毒RT-LAMP试剂盒

Avian Hepatitis E Virus(aHEV)禽戊型肝炎病毒RT-LAMP试剂盒

Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus-1、GaHV-1)禽疱疹病毒1型LAMP试剂盒

Avian Herpesvirus 2(Gallid Herpesvirus-2、GaHV-2)禽疱疹病毒2型LAMP试剂盒

Avian Herpesvirus(Gallid Herpesvirus、GaHV)禽疱疹病毒通用LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒793B型RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒Ark型RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒California型RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒Conn型RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒Delaware型RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒JMK型RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒Mass型RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒荷兰株RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒流行株RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒通用RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Bronchitis Virus(AIBV)禽传染性支气管炎病毒疫苗株RT-LAMP试剂盒

Avian Infectious Laryngotracheitis Virus(AILTV)鸡传染性喉气管炎病毒LAMP试剂盒

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒A亚群RT-LAMP试剂盒

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒B亚群RT-LAMP试剂盒

 越南伯克霍尔德氏菌 Vietnam Burke Holder's bacteria

 西伯利亚库特氏菌 Siberia kurthia

 蜡状芽孢杆菌 Bacillus cereus

 敏捷食酸菌 Agile food acid bacteria

 纺缍形赖氨酸芽孢杆菌 Spindle shaped lysine Bacillus

 耐硼赖氨酸芽孢杆菌 High boron lysine Bacillus

 少动鞘氨醇单胞菌 Sphingomonas paucimobilis

 不动杆菌属 Acinetobacter

 类球红细菌(球形红杆菌) Rhodobacter sphaeroides (Rhodobacter sphaeroides)

 产酸克雷伯氏菌 Klebsiella oxytoca

 阴沟肠杆菌（阴沟肠杆菌阴沟亚种） Enterobacter cloacae (Enterobacter cloacae.)

 枯草芽孢杆菌枯草亚种 Bacillus subtilis subsp.

 迟缓芽孢杆菌 Retardation of Bacillus

 嗜盐四联球菌（酱油片球菌） Tetragenococcus halophilus (soy sauce Pediococcus)

 恶臭假单胞菌 Pseudomonas putida

 木糖氧化产碱菌木糖氧化亚种 Alcaligenes xylosoxidans subsp xylosoxidans

 嗜麦芽寡养单胞菌 Stenotrophomonas maltophilia

 蘑菇假单胞菌保存方法嗜水气单胞菌 Aeromonas hydrophila

 肺炎链球菌 Streptococcus pneumoniae

 产气肠杆菌 Enterobacter aerogenes

 肺炎克雷伯氏菌肺炎亚种 Pneumonia Klebsiella pneumoniae subsp

 奇异变形杆菌 Proteus mirabilis

 化脓性链球菌 Streptococcus pyogenes