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植物类黄酮测试盒 试剂盒

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基本参数

品牌 优选生物/Sinobestbio 产地 上海
产品等级 优级品 产品用途 检测试剂
用途 生化检测 产品规格 50管/24样100管/48样

植物类黄酮(Flavonoid)试剂盒说明书

可见分光光度法

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 

产品内容: 

提取液:60%乙醇,自备。 

试剂一:液体3mL×1瓶,4保存。 

试剂二:液体3mL×1瓶,4保存。 

试剂三:液体20mL×1瓶,4保存。 

产品说明: 

类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。 

在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在502nm处有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在502nm处的吸光值,即可计算样品类黄酮含量。 

自备实验用品及仪器

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。 

操作步骤:

一、类黄酮提取 

将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.1g,加入2.5mL提取液,用超声提取法进行提取,超声功率300W,破碎5s,间歇8s60,提取30min10000g25,离心10min,取上清,用提取液定容至2.5mL,待测。 

二、测定操作表


对照管

测定管

样本待测液(μL

200

200

试剂一(μL

50

50

混匀,25静置5min

试剂二(μL


50

混匀,25静置5min

试剂三(μL

400

400

60%乙醇(μL

350

300

混匀,25静置15 min,对照管调零,1mL玻璃比色皿,测定A502

 

 

 

三、 类黄酮含量计算公式 

标准曲线:y = 6.2096x+0.0008R2 = 0.9996

类黄酮含量(mg/g=A502-0.0008÷6.2096×V反总÷(V÷V样总×W)= 2.013×A502÷W

V样总:加入提取液体积,2.5mL V反总:反应总体积,1mLV样:反应中样品体积,0.2mLW:样品质量,g

注意事项 

1、 吸光值大于0.8,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。 

2、 显色完成后立即测定,2小时后吸光值会下降。 

3、 最低检出限为12.8μg/g 

 

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