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谷草转氨酶(GOT)测试盒

价格 180.00/盒 150.00/盒
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所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

品牌 优选生物/Sinobestbio 产地 上海
产品等级 优级品 产品用途 检测试剂
用途 生化检测 产品规格 50管/24样100管/48样

谷草转氨酶(GOT)活性测定试剂盒说明书

可见分光光度法

正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定

产品内容:

提取液:液体30mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体5mL×1 瓶, 4℃保存;

试剂二:液体5mL×1 瓶, 4℃保存;

试剂三:液体50 mL×1 瓶,4℃保存;

产品说明:

GOT( 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT 在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。

GOT 催化α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应生成2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定505nm 吸光度的变化,即可计算GOT 酶活力。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样品测定的准备

1、 细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、 血清(浆)样品:直接检测。

二、测定操作表

1、 分光光度计预热30min 以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。

2、 EP 管中加入下列试剂

 

 

试剂名称(μL)

测定管

对照管

待测样本

20


试剂一

100

100

混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热30min

试剂二

100

100

待测样本


20

混匀后,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)准确水浴20min

试剂三

1000

1000

混匀,室温放置10min,在505nm 波长处,测各管吸光度。每个测定管需设一个对照管。三、计算

1、 以相对吸光值(A 测定管-A 对照管)为横坐标,相应酶活力单位(U/L)为纵坐标。作标准曲线为:y=(605.07χ2+192.86χ+0.1392)×0.482

2、 血清中GOT 活力(U/L)= 0.482×(605.07χ2+192.86χ+0.1392)。χ 为A 测定管-A 对照管。

3、 微生物、细胞或组织中GOT 活力(U/g 蛋白)=0.482×(605.07χ2+192.86χ+0.1392)÷待测匀浆蛋白浓度(g/L)。χ 为A 测定管-A 对照管。

 

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