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转氢酶-1测试盒

价格	￥1600.00/盒	￥1500.00/盒
起订量	≥1	≥2
所在地	上海上海	可售量 10000盒

联系人：伍雅君

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基本参数

品牌	优选生物/Sinobestbio	产地	上海
产品等级	优级品	产品用途	检测试剂
用途	生化检测	产品规格	50管/48样100管/96样

线粒体转氢酶-1（TH-1）试剂盒说明书

可见分光光度法

正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

TH 位于线粒体的内膜上，又称为呼吸电子传递链复合体六，催化 NADH+NADP⁺和NAD⁺ +NADPH相互转化。催化正向反应称为TH-1。线粒体NADH含量增加时会导致线粒体膜的H+电化学梯度升高，因而促进了电子传递链上ROS的产生。TH-1促进NADH转换为NADPH，从而提高线粒体的抗氧化能力。

测定原理

NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物 3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸磷酸（APADP⁺）替代 NADP⁺，TH-1催化APADP⁺ 还原生成的APADPH在375nm 有特征光吸收，因此通过测定375nm 光吸收增加速率，来计算TH-1 活性。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制

试剂一：液体 50mL×1 瓶，-20℃保存；

试剂二：液体 25mL×1 瓶，-20℃保存；

试剂三：液体 25mL×2 瓶，4℃保存；

试剂四：粉剂×2 支，-20℃保存；

试剂五：粉剂×2 支，-20℃保存；

样本的前处理：

组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：

① 准确称取0.1g组织或收集500万细菌或细胞，加入1mL试剂一，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

② 将匀浆 600g，4℃离心 5min。