产品推荐
-
¥900元
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒
-
¥750元
乙醛脱氢酶(ALDH)测试盒 试剂盒
-
¥2300元
线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性测试盒 试剂盒
-
¥1200元
人白介素2受体 IL-2R ELISA Kit 试剂盒
-
¥1200元
人肝素结合性表皮生长因子 HB-EGF ELISA Kit
上海优选生物科技有限公司
联 系 人:伍雅君 QQ交谈 (联系时,请说明是在全球塑胶网上看到的)
联系电话:섅ꁴ킁-섅킁킁혵
手机号码:킁ꄶꁴ킁혵섅ꄶ
公司官网: http://13564795574.51pla.com
所在地区:上海市 上海市
主营产品: 生物技术,

扫一扫,加我微信
进入店铺-
长春碱含量检测 HPLC液相测定
¥150元
-
长春质碱含量检测 HPLC液相测定
¥150元
-
长春新碱含量检测 HPLC液相测定
¥150元
-
文多灵含量检测 HPLC液相测定
¥180元
-
甜菜碱含量检测 HPLC液相测定
¥150元
酰基转移酶(alcohol acyl transferase ,AAT)
活性测定试剂盒说明书
微量法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
AAT是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种酰基化和去酰基化反应,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。
测定原理:
AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,释放的CoA还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412nm吸光度增加速率可计算AAT活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×1 管,-20℃保存。临用前加蒸馏水 1mL 充分溶解,4℃保存。
试剂四:液体 2 mL×1 管,4℃保存。
试剂五:粉剂×1 管,4℃避光保存。临用前加入试剂二 1mL 充分溶解,4℃避光保存。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间 3min);然后 12000g,4℃,离心20min,取上清置于冰上待测。
3. 液体:直接检测。
AAT 测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到412nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在37℃水浴保温30min以上。
3. 空白管:依次在 1mL 玻璃比色皿中依次加入 20μL 蒸馏水、140μL 预热的试剂二、10μL 试剂三、20μL 试剂四和 10μL 试剂五,迅速混匀后于 412nm 比色,记录 10 s 和 130 s 的吸光值,分别记为 A1 和 A2。△A 空=A2-A1。空白管只需做 1 个。
4. 测定管:依次在 1mL 玻璃比色皿中依次加入 20μL 上清液、140μL 预热的试剂二、10μL 试剂三、20μL 试剂四和 10μL 试剂五,迅速混匀后于 412nm 比色,记录 10 s 和 130 s 的吸光值,分别记为A3 和 A4。△A 测=A4-A3。如果△A 测偏低,可以延长反应时间,如测定 10 s 和 310 s 的吸光度,相应修改计算公式中反应时间。
AAT 活性计算:
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按照蛋白浓度计算
活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化 0.001 个单为1U。
AAT (U/mg prot) = 1000×(△A 测—△A 空)÷(Cpr×V 样) ÷T
= 5000×(△A 测—△A 空)÷Cpr
(2)按照样本质量计算
活性单位定义:37℃中每克组织每分钟催化吸光值变化 0.001 个单为1U。
AAT (U/g) = 1000×(△A 测—△A 空)÷(W×V 样÷V 样总) ÷T
= 5000×(△A 测—△A 空)÷W
(3)按细胞数量计算
活性单位定义:37℃中每104个细胞每分钟催化吸光值变化 0.001 个单为1U。
AAT (U/104 cell) = 1000×(△A 测—△A 空)÷(细胞数量×V 样÷V 样总) ÷T
= 5000×(△A 测—△A 空)÷ 细胞数量
Cpr:上清液蛋白浓度,mg/mL,蛋白质浓度需要另外测定;V 样:加入反应体系中上清液体积,0.1mL;W:样本质量,g:V 样:加入反应体系中上清液体积,0.1mL;V 样总:提取液体积,1mL;T:反应时间,2 min。
b.使用 96 孔板测定的计算公式如下
(1)按照蛋白浓度计算
活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。
AAT (U/mg prot) = 1000×(△A 测—△A 空)×V 总÷(Cpr×V 样) ÷T
= 5000×(△A 测—△A 空)÷Cpr
(2)按照样本质量计算
活性单位定义:37℃中每克组织每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。
AAT (U/g ) = 1000×(△A 测—△A 空)×V 总÷(V 样÷V 样总×W) ÷T
= 5000×(△A 测—△A 空)÷W
(3)按细胞数量计算
活性单位定义:37℃中每104个细胞每分钟催化吸光值变化0.001个单位为1U。
AAT (U/104 cell) = 1000×(△A 测—△A 空)÷(细胞数量×V 样÷V 样总) ÷T
= 5000×(△A 测—△A 空)÷ 细胞数量
Cpr:上清液蛋白浓度,mg/mL,蛋白质浓度需要另外测定;V 样:加入反应体系中上清液体积,0.02mL;V 总:反应总体积,0.2 mL;W:样品质量,g;V 样总:提取液体积,1 mL;T:反应时间,15min。Cpr:上清液蛋白浓度,mg/mL,蛋白质浓度需要另外测定;V 样:加入反应体系中上清液体积,0.02mL;V 总:反应总体积,0.2 mL;W:样品质量,g;V 样总:提取液体积,1 mL;T:反应时间,2min。
注意事项:
1. 上清液蛋白质含量需要另外测定。建议购买本公司生产的 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。
2. 配制好后未使用完的试剂 4℃保存,3 天内使用完毕。
上海优选生物科技有限公司

联系人:
伍雅君

服务热线:
킁ꄶꁴ킁혵섅ꄶ
섅ꁴ킁-섅킁킁혵

公司地址:
上海市浦东新区港澳路271号1幢2层
酰基转移酶(AAT)测试盒 试剂盒相关产品
猜你在找
- 水杨基羟肟酸 是一种对锡钨稀土铜铁等金属氧化矿物 做稀土矿 氧化铜矿 氧化铅锌矿
- 苯甲羟肟酸 用于菱锌矿 黑钨矿和白钨矿及锡石等难选矿物的有效捕收剂
- 难选氧化铜捕收剂TL-003 有色金属氧化矿和氧硫混合矿的优良捕收剂 回收率提高
- 苯乙烯膦酸 黑钨矿锡石细泥 锡石黑钨矿 作为钛矿物的良好捕收剂 迈凯瑞
- 2-羟基-3-萘甲羟肟酸 用于锡石稀土矿氧化铜矿 氧化铅锌矿等的捕收剂 迈凯瑞
- 钛铁矿捕收剂 TKL-301 用量少 成本低 选择性和分选效率高 钛铁矿捕收剂产品
- 乙基钠黄药 用于易浮硫化的浮选及复杂硫化矿的浮选 用作湿法冶金沉淀剂 应用的捕收剂
- 力浮铜 有色金属矿选有色金属 用于铜 铅 锌及金属金 银 迈凯瑞 25公斤/袋
- A80起泡剂 用作有机合成原料及有色金属矿石浮选优良起泡剂 迈凯瑞
- 809号捕收剂 硫化矿的优良捕收剂 提高捕收能力的有色金属矿的浮选 迈凯瑞
- 水杨醛肟 用于氧化锌矿 锡石矿的活化 用在黄药浮选体系 迈凯瑞支持试样
- 氧化铅捕收剂ZNP 良好的浮铅选择性能 耐低温性能 常温浮选 节能降耗 迈凯瑞
免责声明:以上展示的酰基转移酶(AAT)测试盒 试剂盒信息由上海优选生物科技有限公司自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责,
全球塑胶网对此不承担责任。
风险防范建议:为保障您的利益,建议优先选择速购通会员
手机版:酰基转移酶(AAT)测试盒 试剂盒
更新产品链接为:https://www.51pla.com/html/sellinfo/404/40411950.htm
发送询价单