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磷脂酶D(PLD)测试盒试剂盒

价格	￥6300.00/盒	￥6000.00/盒
起订量	≥1	≥2
所在地	上海上海	可售量 10000盒

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基本参数

品牌	优选生物/Sinobestbio	产地	上海
产品等级	优级品	产品用途	检测试剂
用途	生化检测	产品规格	50管/48样100管/96样

磷脂酶D（Phospholipases D，PLD）试剂盒说明书

可见分光光度法

产品内容：

提取液：液体50mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体55mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体8mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用前加3mL无水乙醇醇充分溶解。

试剂四：液体35mL×1 瓶，4℃避光保存。

标准品：液体1mL×1 支，4℃避光保存。

产品说明：

磷脂酶D（EC3.1.4.4）即磷脂酰胆碱水解酶，是催化磷酸二酯键水解和碱基交换反应的一类酶的总称，广泛存在于高等动植物和细菌等多种生物体中，具有参与胞脂质代谢、信号转导、生物膜形成的抗逆境胁等生理功能。

磷脂酶D催化水解磷脂酰胆碱末端的磷脂酰二酯键生成磷脂酸和胆碱，胆碱在胆碱氧化酶催化作用下生成甜菜碱和过氧化氢，过氧化氢在过氧化氢酶的作用下将4-氨基安替比林和重蒸酚氧化成粉红色物质，在500nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器：

天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅，无水乙醇。

操作步骤：

一、酶液提取

1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5-10 的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g 离心5min，取全部上清于4℃，100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL 试剂一。

2. 细胞：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500-1000：1 的比例（建议500万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞，功率300w，超声3 s，间隔7 s，总时间3min）；然后于4℃，10000g 离心5min，取全部上清于4℃、100000g 离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL 试剂一。

3. 血清：直接测定。

二、测定操作

	空白管	标准管	测定管
试剂一（mL）	0.1
试剂二（mL）	0.15	0.15	0.15
标准品（mL）		0.1
样品（mL）			0.1
试剂三（mL）	0.05	0.05	0.05
充分混匀，30℃反应30min，沸水浴10min，打开盖子，自然冷却 5mi。
试剂四（mL）	0.7	0.7	0.7
30℃反应30min，于1mL 玻璃比色皿，空白管调零，测定500nm 处吸光值，分别记为A 标准管和A 测定管。