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蔗糖磷酸合成酶(SPS)测试盒 试剂盒

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基本参数

品牌 优选生物/Sinobestbio 产地 上海
产品等级 优级品 产品用途 检测试剂
用途 生化检测 产品规格 50管/24样100管/48样

蔗糖磷酸合成酶(Sucrose phosphate synthase,SPS)试剂盒说明书

分光光度法

产品内容:

提取液:液体60mL×1瓶,4保存;

试剂一:液体10mL×1瓶,-20保存;

试剂二:1000μg/mL蔗糖溶液10mL×1瓶,4保存;

试剂三:液体5mL×1瓶,4保存;

试剂四:液体40mL×1瓶,4保存;

试剂五:液体10mL×1瓶,4保存;

产品简介:

蔗糖不仅是重要的光合产物,也是植物体内运输的主要物质,还是碳水化合物的贮存形式之一。蔗糖磷酸合成酶(SPS)以果糖-6-磷酸为受体,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看作是蔗糖合成的主要途径。

蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸与间苯二酚反应可呈现颜色变化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小与颜色的深浅成正比。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

操作步骤:

一、测定样品提取:   

按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。   

二、测定操作表:

按下表操作:

试剂名称(μL

测定管

对照管

标准管

空白

样本

30

30



蒸馏水


150

150

180

试剂一

150




试剂二



30


混匀,25℃准确水浴10min

试剂三

50

50

50

50

沸水浴中煮沸10min左右(盖紧,以防止水分散失),冷却

试剂四

700

700

700

700

试剂五

200

200

200

200

混匀,沸水浴30min冷却后,480nm下测定各管吸光值。标准管和测定管只要做一管。每个测定管需要设定一个对照管。

三、SPS活力单位的计算:

1、 按照蛋白浓度计算

单位定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SPS活性g/min/mg prot)=C标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷Cpr

2、 按照样本鲜重计算

单位定义:每g组织每分钟催化产生1μg 蔗糖定义为一个酶活力单位。

SPS活性g/min /g鲜重)=C标准管×V1×(A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A测定管-A对照管)÷A标准管-A空白管W

C标准管:标准管浓度,1000μg/mLV1:加入反应体系中样本体积,0.03mLV2:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本鲜重,gT:反应时间:10min

 

 

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