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蔗糖磷酸化酶测试盒试剂盒

价格	￥3000.00/盒	￥2900.00/盒
起订量	≥1	≥2
所在地	上海上海	可售量 10000盒

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基本参数

品牌	优选生物/Sinobestbio	产地	上海
产品等级	优级品	产品用途	检测试剂
用途	生化检测	产品规格	50管/48样100管/96样

蔗糖磷酸化酶（Sucrose Phosphorylase, SP）试剂盒说明书

微量法

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中，裂解葡萄糖苷键，催化葡萄糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等，合成相应的葡萄糖基低聚糖。此外，SP还能催化氢醌合成熊果苷，

具有极强的美白效果，在化妆品工业中具有重要应用。

测定原理：

SP能够以磷酸为受体，催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下还原NADP⁺生成NADPH，导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率，即可计算SP活性。

自备实验用品及仪器：

天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。

缓冲液：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存。

试剂三：液体 1mL×1 支，4℃保存。

试剂四：粉剂 1 支，-20℃避光保存，临用前加 1mL 双蒸水溶解。

试剂五：粉剂 1 支，-20℃避光保存，临用前加 1mL 双蒸水溶解。

试剂六：粉剂 1 支，-20℃避光保存，临用前加 2mL 双蒸水溶解。

试剂七：粉剂 1 支，-20℃避光保存，临用前加 2mL 双蒸水溶解。

粗酶液提取：

1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心10min，取上清待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（10⁴个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

测定操作表：

1、分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长至340nm。

2、操作表

	对照管	测定管
缓冲液（μL）	85	65
试剂一（μL）	50	50
试剂二（μL）	3	3
试剂三（μL）	2	2
试剂四（μL）	10	10
试剂五（μL）	10	10
试剂六（μL）	20	20
试剂七（μL）	20	20
混匀，37℃水浴预热 5min
样本（μL）		20
迅速混匀，于微量石英比色皿/96孔板，对照管调零，测定340nm 的初始值A1 ，测定完立即放入37℃水浴准确反应2min，对照管调零，迅速测定340nm吸光值A2，△ A=A2-A1。