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血钠浓度检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
血钠在维持正常的细胞外液容量和渗透压,以及体液的酸碱平衡中起重要作用。
测定原理:
血清中钠与焦锑酸钾试剂在弱碱性溶液中生成沉淀,沉淀的多少与钠浓度成正比,根据其浊度可测定血清中钠含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、去离子水和无水乙醇。
试剂组成和配置:
试剂一:液体×1 瓶,4℃保存。如果出现胶状物,置于沸水浴中加热溶解后再用。
标准液:液体×1 瓶,140 mmol/L 钠标准液,4℃保存。
血钠浓度测定操作:
1. 分光光度计预热30min,调节波长到520nm,蒸馏水调零。
2. 血清预处理:取EP管,加入100μL血清,900μL无水乙醇,充分混匀,8000g,4℃,离心10min,取上清液待测。
3. 空白管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL蒸馏水,1000μL试剂一,充分混匀,室温静置5min,于520nm 测定吸光度,记为A空白管。
4. 标准管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL标准液,1000μL试剂一,充分混匀,室温静置5min,于520nm 测定吸光度,记为A标准管。
5. 测定管:取1mL玻璃比色皿,依次加入100μL上清液,1000μL试剂一,充分混匀,室温静置5min,于520nm 测定吸光度,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需测定一次。
血钠浓度计算公式:
血钠含量(mmol/dL)= [C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×样品稀释倍数×V 样总=140×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
C 标准液:140 mmol/L;样品稀释倍数:(100μL血清+900μL无水乙醇)÷100μL 血清=10;V 样总:1dL=0.1 L。
注意事项:
1. 血液采取过程中,宜空腹采血,避免使用枸橼酸钠抗凝剂。
2. 最低检出限为 1 mmol/L。
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