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土壤中性磷酸酶(S-NP)测试盒试剂盒

价格	￥450.00/盒	￥430.00/盒
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所在地	上海上海	可售量 10000盒

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基本参数

品牌	优选生物/Sinobestbio	产地	上海
产品等级	优级品	产品用途	检测试剂
用途	生化检测	产品规格	50管/48样100管/96样

土壤中性磷酸酶

（soil neutral phosphatase，S-NP）活性测定试剂盒说明书

可见分光光度法

注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

土壤磷酸酶是催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。磷酸酶活性受到土壤碳、氮

含量、有效磷含量和pH的显著影响，根据最适PH范围，一般把土壤磷酸酶分为中性、酸性和碱性三种类型。

测定原理：

中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出 NP 活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。

试剂组成和配制：

试剂一：液体×1 瓶，4℃ 避光保存。

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。用前加 50mL 蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂四：粉剂×1 瓶，4℃ 避光保存。临用前加1152μL无水乙醇（自备），48μL蒸馏水充分溶解。（变褐色后不能再使用）

标准品：液体×1 瓶，0.5 μmol/mL 酚标准液，4℃保存。

催化反应：

称取风干混匀土壤约0.1g，加入50μL甲苯（自备），轻摇15min；加400μL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。8000g，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。

显色反应：

1. 分光光度计预热30min，调节波长到660nm，蒸馏水调零。

2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL 蒸馏水，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后25℃静置30 min，于660nm 测定吸光度，记为A空白管。

3. 标准管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL标准液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后25℃静置 30min，于 60nm测定吸光度，记为A标准管。

4. 测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL上清液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后25℃静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A测定管。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

S-NP 活性计算：

活性单位定义：37℃中每克土壤每天释放 1nmol 酚为 1 个酶活单位。

S-NP（nmol/d/g）= [C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V 总÷W÷T

= 725×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W

C 标准液：0.5μmol/mL；V 总：催化体系总体积，1.45mL；W：土壤样品质量，g；T：催化反应时间，24h=1d。

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