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土壤铵态氮试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品组成:
提取液:液体55mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×2瓶,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加10mL双蒸水溶解,现配现用。
试剂二:液体20mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体5mL×1瓶,4℃保存。
产品说明:
土壤中的铵态氮可被土壤胶体吸附,呈交换性铵状态氮肥,也可溶解在土壤溶液中,能直接被植物吸收利用,属于速效性氮素。
土壤中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,在625nm处有特征吸收峰,吸光值与铵态氮含量成正比。
自备实验用品及仪器:
天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿,振荡仪。
操作步骤:
一、样本处理
按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g新鲜土样,加入1mL提取液),振荡提取1h,10000g ,25℃离心10min,取上清液待测。
二、测定操作表
空白管 |
测定管 |
|
样本(μL) |
100 |
|
提取液(μL) |
100 |
|
试剂一(μL) |
400 |
400 |
试剂二(μL) |
400 |
400 |
充分混匀,25℃静置1h |
||
试剂三(μL) |
100 |
100 |
充分混匀,于1mL玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定625nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管 |
三、计算公式
标准曲线:y = 0.3672x-0.0377,R2= 0.9993
NH4+—N含量(mg/kg)=(△A+0.0377)÷ 0.3672×V反总÷(W×V样÷V样总)
= 27.23×(△A+0.0377)÷W
V反总:反应总体积,1mL;V样:反应体系中加入样本体积,0.1mL;V样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g
注意事项:
1. 试剂一必须避光低温保存,配制好的试剂一4℃保存不能超过20天。
2. 浸提液最好在当日完成测定,如果不能完成,可冷冻保存,但不能超过两天。
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