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土壤木质素过氧化物酶(Soil linin peroxidase,S-Lip)试剂盒
紫外分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
产品内容:
试剂一:液体25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体15mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体10mL×1 瓶,4℃保存
产品说明:
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系, 在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿、震荡仪、甲苯。
测定操作
测定管 |
|
上样(g) |
0.1 |
甲苯(μL) |
50 |
25℃静置15min |
|
试剂一(μL) |
500 |
震荡30min,10000rpm,4℃离心15min,取上清500μL |
|
试剂二(μL) |
300 |
试剂三(μL) |
200 |
充分混匀,于1mL 石英比色皿,蒸馏水调零,测定310nm 处10s 和310s 吸光值,记为A1 和A2,△A=A2- A1 |
酶活计算公式
酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol 藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(nmol/min/g)=△ A/(ε×d) ×V 反总÷W÷T= 21.5×△ A÷W D e
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,1mL; W:样本质量,g;T:反应时间,5min
上海优选生物科技有限公司
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