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土壤有效硫试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
土壤硫对农林畜牧具有重要作用,环境中许多污染物都是含硫化合物,通过大气传输沉降到土壤中,对生态系统产生一定的影响,土壤中的硫可被植物吸收利用。
测定原理
利用硫酸钡比浊法测定。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、震荡仪。
试剂组成和配制
酸性土壤提取液:液体 55mL×1 瓶,4℃保存。
碱性土壤提取液:液体 55mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 1mL×1 支,4℃保存。
试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂四:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
样本处理
新鲜土样风干,过20目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为1:5的比例(建议称取约0.2g土样,加入1mL提取液),振荡提取1h,10000g ,25℃离心10min,取上清液待测。
测定操作表
空白管 |
测定管 |
|
样本(μL) |
200 |
|
提取液(μL) |
200 |
|
试剂一(μL) |
20 |
20 |
90℃开盖消煮 5min,取出自然冷却 |
||
试剂二(μL) |
200 |
200 |
试剂三(μL) |
400 |
400 |
试剂四(μL) |
200 |
200 |
充分混匀,25℃震荡 20min |
||
于1mL玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定440nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管 |
计算公式
标准曲线:y =0.0112x+0.0377,R2=0.9976
有效硫含量(mg/kg)=(△A-0.0377)÷ 0.0112×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)
= 446.43×(△A-0.0377)÷W
V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应体系中加入样本体积,0.1mL;V 样总:加入提取液体积,1mL,W:样本质量,g
注意事项
1. 酸性和碱性土壤提取液不一样,提取前必须确认土壤的酸碱性,加入对应的提取液。
2. 90℃消煮必须开盖,使试剂一完全散出。
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