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土壤酸性转化酶(S-AI)测试盒 试剂盒

价格 1000.00/盒 950.00/盒
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基本参数

品牌 优选生物/Sinobestbio 产地 上海
产品等级 优级品 产品用途 检测试剂
用途 生化检测 产品规格 50管/24样100管/48样

土壤酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

货号:YX-C-B930

规格:50T/24S 产品说明:

S-AI pH 4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物

蔗糖代谢关键酶之一。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水、甲苯。

操作步骤:

一、测定步骤及加样表:

1、分光光度计/酶标仪预热 30min,波长调至 540nm,蒸馏水调零。

2、标准液的稀释:将 10mg/mL 葡萄糖标准液用试剂一稀释至 43210.80.6 mg/mL

的葡萄糖标准溶液备用。

3、加样表:

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

土样(g

0.1

0.1

-

-

试剂一(μL

-

800

-

800

试剂二(μL

800

-

-

-

标准液(μL

-

-

800

-

甲苯(μL

20

20

20

20

混匀,37℃准确水浴 1h 后,煮沸 10min 左右盖紧,以防止水分散失,流水或冰浴冷

却后充分混匀(以保证浓度不变),10000rpm,常温离心 10min,取上清 150μL 600μL 剂一混合即将上清液稀释 5 倍。

上清稀释液μL

700

700

700

700

试剂三(μL

300

300

300

300

混匀,煮沸 10min 左右盖紧,以防止水分流失,流水冷却后充分混匀,540nm 处蒸馏水调零,记录各管吸光值A,记为 A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算ΔA=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。

二、S-AI 活性计算:

1 标准曲线的绘制:

以葡萄糖浓度为 x 轴,相应的ΔA 标准为 y 轴,绘制标准曲线,得到标准方程 y=kx+b;将ΔA 入公式得到 xmg/mL

2 S-AI 活性计算

单位定义:37℃每 g 土壤每天产生 1mg 还原糖定义为一个酶活性单位。


S-AIU/g=x×V 酶促÷W÷T

V 酶促:酶促反应总体积,0.820mLW:样本鲜重,gT:反应时间:1/24d

注意事项:

1、如果加入试剂三,煮沸 10min 后有混浊物出现,建议离心除去沉淀(10000rpm2min),取上清测定吸光度;

2如果吸光值大于 1,可以将上清液再进行稀释;若吸光值较小,可以减少上清液稀释倍数。两种操作均要注意改变公式中的稀释倍数。

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