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BCA蛋白法含量测试盒 试剂盒

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基本参数

品牌 优选生物/Sinobestbio 产地 上海
产品等级 优级品 产品用途 检测试剂
用途 生化检测 产品规格 50管/48样100管/96样

BCA 蛋白浓度测定试剂盒

货号:YX-W-C202

规格:500 微孔(50T) 保质期:有效期 1 年。

产品简介:

碱性条件下,蛋白将 Cu2+ 还原为 Cu+ Cu+ BCA 试剂形成紫蓝色的络合物,测定其在

562nm 处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。操作说明:

. 微孔酶标仪法

a. 配制工作液:根据标准品和样品数量,按 50 体积 BCA 试剂加 1 体积 Cu 试剂50:1配制成 BCA

工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)BCA 工作液室温 24 小时内稳定。

b. 稀释标准品:取 10 微升 BSA 标准品用 PBS 稀释至 100 微升样品一般可用 PBS 稀释,使终浓度

0.5 mg/ml。将标准品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20 微升加到 96 孔板的蛋白标准品孔中,加 PBS 补足至 20 微升。

c. 将样品作适当稀释最好多做几个梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀释,加 20 微升到 96 孔板的样孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。

d. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液,37℃放置 15-30 分钟。用酶标仪测定 A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

. 分光光度计法

如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下:

1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按 50 体积 BCA 试剂加 1 体积 Cu 试剂(50:1配制成 BCA 工作

液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)BCA 工作液室温 24 小时内稳定。

2. 稀释标准品:取 100 微升 BSA 标准品用 PBS 稀释至 1ml样品一般可用 PBS 稀释,使终浓度为

0.5mg/ml

3. 取八支(或者更多)5ml 离心管,标上号,按下表加入试剂。

 

离心管号

1

2

3

4

5

6

7(样品管 1)

8(样品管 2)

9(样品管

3)

标准蛋白

BSA

0

40ul

80ul

120ul

160ul

200ul

200ul 适当稀释

的样品 1

200ul 适当稀释

的样品 2

……

PBS

200ul

160ul

120ul

80ul

40ul

0

0

0

0


BCA 工 作液

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

4. 37℃放置 15-30 分钟。用分光光度计测 562nm 处吸光值,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

 

注意事项:

1. 长期不用时,Cu 试剂与 PBS 稀释液可置于 2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA 试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可 37℃温育使其完全溶解, 不影响使用。

2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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