Anti-phospho-GIT1(Ser375)

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英文名称  Anti-phospho-GIT1(Ser375)
中文名称  磷酸化G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白1抗体
浓 度  1mg/1ml

规 格  0.1ml/100μg

抗体来源  Rabbit

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Chicken

产品类型  一抗  磷酸化抗体

研究领域  肿瘤 免疫学 G蛋白偶联受体 G蛋白信号

蛋白分子量  predicted molecular weight: 84kDa

性    状  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human GIT1 around the phosphorylation site of Ser375

亚    型  IgG

纯化方法  affinity purified by Protein A

储 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500 
别    名 GIT1 (phospho S375); p-GIT1 (phospho-S375); ARF GAP GIT1; ARF GTPase activating protein GIT1; CAT 1; Cat1; Cool associated and tyrosine phosphorylated protein 1; G protein coupled receptor kinase interactor 1; GRK interacting protein 1.
标记抗体的原理：
 Anti-phospho-GIT1(Ser375)FITC异硫氰酸荧光素是目前较为常用的标记抗体的方法，FITC一般呈黄色、褐色或褐黄色粉末或结晶，性质稳定在低温中能保存数年。在碱性条件下，FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基共价结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个抗体分子上最多能标记15~20个FITC分子，被标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力，在荧光灯源紫外线或蓝紫光激发下产生黄绿色荧光，通过荧光显微镜进行观察或利用流式细胞仪分析，从而对抗原进行定性、定位或定量。

直接标记法：
抗体的准备：取提纯的Ig溶液测定蛋白质含量，置于三角烧瓶中加入生理盐水和0.5mol/L pH9.5碳酸盐缓冲液，冰槽中搅拌5~10min；
荧光素的准备：按每毫克蛋白质加0.01~0.02mg的FITC计算，准确称取后加入抗体溶液中；
标记：边搅拌边加入荧光素，避免粉末黏附于壁上，置于4℃冰箱或冰库继续搅拌12~18h；
透析：结合完毕后，先将结合物以3000r/min离心20min，除去少量沉淀物后装入透析袋中再置于pH8.0缓冲盐的烧杯中透析过夜；
过柱：取透析过夜的标记物，过葡聚糖凝胶G-25或G-50柱，分离游离的FITC，收集标记的荧光抗体进行鉴定。
间接标记法：
抗体的准备：0~4℃下，用0.01mol/L pH8.0 PBS将待标记的抗体蛋白溶液稀释到浓度为30~40mg/ml，置于三角烧瓶内放入冰槽中；
荧光素的准备：按每毫克蛋白质加入0.01mg的荧光素称取，溶解于等量的3%重碳酸钠水溶液中；将抗体蛋白溶液与FITC溶液等量混合，在0~4℃中搅拌18~24h，充分搅匀；
透析或过柱层析。
改良法：
抗体的准备：取提纯的Ig溶液测定蛋白质含量，置于三角烧瓶中加入生理盐水和0.5mol/L PH9.5碳酸盐缓冲液，冰槽中搅拌5~10min；
荧光素的准备：按每毫克蛋白质加0.01~0.02mg的FITC计算，准确称取后加入抗体溶液中；
标记：边搅拌边加入荧光素，避免粉末黏附于壁上，置于4℃冰箱或冰库继续搅拌12~18h；
用半饱和硫酸铵将标记的抗体蛋白沉淀分离，3000r/min离心30min，倾去上清液中的游离荧光素，再用缓冲盐水透析除去硫酸铵。将制备好的荧光抗体加0.01%NaN3,分装保存。

透析法：
用0.025mol/L PH9.2碳酸盐缓冲液，将待标记的抗体蛋白稀释成1%浓度，装入透析袋中；
用同一缓冲液将FITC制成0.1mg/ml的溶液，置于圆形容器内，并将透析袋浸没其中，4℃搅拌24h；
取出透析袋中标记液。立即过葡聚糖凝胶G-25或G-50柱，除去游离荧光素，收集荧光抗体进行鉴定。
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人细胞裂解液 (阳性对照) 周效磺胺(磺胺多辛)质量规格：>99%,BRsulphadoxine

大鼠肝细胞;BRL 3A周效磺胺(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品sulphadoxine

IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸罗匹尼罗质量规格：>98.0%Ropinirole HCl

L1210瘤 白血病盐酸罗哌卡因质量规格：>99%,BR,一水合物Ropivacaine hydrochloride

HCC 94 [HCC941122]人子宫鳞癌细胞(高分化) HCC 94 [HCC941122] in human uterine squamous cell carcinoma (high differeiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS盐酸罗哌卡因(标准品)质量规格：标准品>99%,标准品Ropivacaine hydrochloride
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 6aR,11aR）3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷质量规格：HPLC≥98%，标准品3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan

间充质干细胞软骨细胞分化培养基MCDM千层纸素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷质量规格：HPLC≥98%，标准品Oroxyloside

水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3 细胞，Hela细胞 HEL299(红白细胞白血病细胞)甲壳素；几丁质质量规格：BRChitin

EB病毒转化的人B细胞;KMY0910辅酶 A质量规格：>85%,BRCoenzyme A, free acid, hydrate (COA)

MESDC2 Others Human 人 MESDC2 / MESD 人细胞裂解液 (阳性对照) 多效唑质量规格：>95%,BRPaclobutrazol
NRL1 化大家鼠肺成纤维样细胞阿糖腺苷一水物质量规格：美国进口Vidarabine Monohydrate

大额牛肺细胞;BFR-L1盐酸倍他司汀-d3质量规格：美国进口Betahistine-d3 Dihydrochloride

Ishikawa, 人子宫内膜癌细胞系倍他司汀一盐酸盐质量规格：美国进口Betahistine Hydrochloride

人脑瘤细胞;SF767 大鼠腮腺细胞完全培养基 100mL倍他司汀-d3质量规格：美国进口β-Histine-d3

肾系膜细胞生长添加物MCGS阿卡地新(AICAR)质量规格：>98%,BRAcadesine
 Anti-phospho-GIT1(Ser375)人肾小管上皮细胞HRPTEpiC间酚紫，英文名或英文缩写：m-Cresol purple，级别：BR，98%，规格：250克

VLcop细胞，人前列腺癌细胞 小鼠肺腺癌细胞系,LA795细胞 小鼠成纤维细胞MLF2-本基-1-炳醇;β-本炳醇;2-本炳醇;β-羌基异炳本;β-基本基醇 2-Phqnyl-1-propcnol;2-Phqnylpropyl clcohol;β-xy7noxyisopropylbqnzqnq;β-Mqthylphqnqthyl clcohol;β-xy7noxycuMqnq;xy7notropic clcohol 98103-87-8

L W-3A(小鼠皮下结缔组织细胞) 5×106cells/瓶×2N-叔丁氧羰基-L-脯醇，英文名或英文缩写：BOC-L-Prolinol，级别：BR，98%，规格：1克

AAV-293(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R027大鼠食管上皮细胞完全培养基100mL 人羊膜细胞;WISH2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)，英文名或英文缩写：AIBA，级别：AR，97%，规格：100毫克

CM-H111人成骨细胞完全培养基100mL122-31-61.1.3.3-四乙氧基　95%Malonaldehyde bis(dietxyl acetal)

抗体的结构：
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链(H链)；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链(L链)。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种，重链有μ、δ、γ、ε和α五种。 整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中，不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于"Y"的两臂末端。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈，这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域称高变区。高变区位于分子表面，最多由17个氨基酸残基构成，少则只有2 ～ 3个。高变区氨基酸序列决定了该抗体结合抗原抗原的特异性。一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的，位于两臂末端称抗原结合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部称结晶片段(crystalline fragment,FC)，糖结合在FC 上。