东莞市亨旺塑化有限公司
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聚醚酰亚胺PEI 基础创新塑料(美国) 2310R-111/7301 耐高温PEI 医疗级 食品级

价格 38.00/公斤
起订量 ≥25
所在地 广东 东莞 可售量 10000公斤

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基本参数

牌号 2310R-111 厂商 基础创新塑料(美国)
品牌 基础创新塑料(美国) 加工级别 特产
销售方式 经销 用途级别 食品 医疗
特性级别 耐高温 类型 标准料
牌名 2310R-111 厂家 基础创新塑料(美国)

聚醚酰亚胺PEI 基础创新塑料(美国) 2310R-111/7301 耐高温PEI 医疗级 食品级

1、配置10%(v/v)(5%(m/V))的PEI储存液。取10ml的PEI用双蒸水稀释为70ml,并以浓盐酸调节PH至7.9。最后用双蒸水定容体积为100ml。储存液在冷室和室温下稳定。

2、在30ml含有50mmol/L Tris-HCL(PH7.9)、5%甘油、0.1mmol/L EDTA、0.1mmol/L DTT和0.15mol/L NaCl的缓冲液中通过超声破碎E.Coli细胞(约3g菌体)。再以15000r/min离心15min去除细胞碎片。所有操作在冰上进行。

3、加入PH7.9 10%(V/V)PEI,使其终浓度为0.3%(v/V),混合5min,直到形成稠密的白色沉淀物。

4、5000r/min离心5min。注意不要离心太实,否则沉淀不易重悬。将0.3%的PEI上清弃去,保存沉淀,干燥沉淀1-2min尽量去除残留的上清液。

5、用上述含有0.4mol/L的NaCl缓冲液30ml,充分重悬0.3%PEI沉淀物。洗脱与PEI结合的微酸性杂质蛋白,静止5min,5000r/min离心去除0.4mol/L的NaCL上清。

6、用上述含0.9mol/L的NaCl缓冲液30ml,充分重悬步骤5沉淀物,此沉淀物含有更多的强酸性蛋白质。此时经过洗脱后强酸性蛋白质位于0.9mol/L的NaCl缓冲液中,核酸会存在于沉淀中(可采用1.6mol/L的Nacl洗去核酸),静止和离心收集上清液。

7、上清液中含有目标强酸性蛋白和PEI,加入固体硫酸铵使其饱和度达到60%,沉淀30min。此时目标蛋白在沉淀中,PEI在上清中,离心收集沉淀,沉淀中含有微量 的PEI不影响后续操作。

注意:步骤7中从0.9mol/L的NaCL溶液中去除PEI时必要的(采用硫酸铵沉淀法),如果采用稀释或者透析降低盐浓度,蛋白质会与PEI结合并再次沉淀。

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