北京奥秘佳得 OMIGET品牌 慢病毒纯化试剂盒 (磁珠型)2h快速纯化慢病毒
价格 | ¥4731.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 北京 北京 | 可售量 10000盒 |
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基本参数
纯度 | 多组分 | 规格 | 试剂盒 |
品牌 | omiget | 用途范围 | 生化研究 |
包装类型 | 盒 | 保质期 | 12个月 |
产品规格 | 10T/kit | 产品名称 | 高纯质粒小提试剂盒 |
产品用途 | 生化研究 | 执行标准 | 行标 |
保存条件 | 4℃保存 |
慢病毒纯化试剂盒 (磁珠型)
一、产品简介。
本产品是一款以磁珠为分离介质的慢病毒纯化试剂。在特定的缓冲体系中,磁珠可吸附慢病毒,并被特定的洗脱液(或 PBS 与 ddH2O)洗脱下来。慢病毒纯化后,滴度提高 10 倍以上,且利用 PBS或 ddH2O 洗脱后的慢病毒不含其它化合物,可直接用于动物体内注射。
二、运输与存储条件。
本产品低温运输,4 ℃保存,有效期 12 个月。
三、特点与优势。
1. 本试剂纯化效率高,磁珠吸附慢病毒的效率达到 95%以上。
2. 纯化后的慢病毒滴度提高 10 倍以上。
3. 本试剂盒纯化的慢病毒不含其它化合物,可以直接用于动物实验。
4. 本试剂盒操作简单,能够在 2 h 内完成慢病毒的纯化实验。
四、使用说明。
1. 慢病毒包装。慢病毒包装实验请参考本公司产品(慢病毒包装试剂盒,Cat:OmL-01)说明书中的实验步骤。
2. 含慢病毒的细胞培养上清收集。293T 细胞(直径为 100 mm 培养皿培养)转染慢病毒包装质粒及骨架质粒后 48 h,收集第一批细胞培养上清(10 ml),并加入 10 ml 新鲜细胞培养液,继续培养 24-48 h,收集第二批细胞培养上清(第二批收集的细胞培养上清中慢病毒滴度高于第一批)。所有含有慢病毒的细胞培养上清保存在 4℃冰箱中。
3. 慢病毒纯化。本产品提供的慢病毒纯化体系是 20 ml,各组份如下表。参照下表将各种试剂与含有慢病毒的细胞培养上清加入 50 ml 无菌离心管中,置于旋转混合器中,4 ℃旋转混合 60 min。
4. 磁珠收集。将离心管置于磁力架上,4 ℃静置 5-10 min,使磁珠聚集,弃上清(或 5 000 rpm,4 ℃离心 5 min,沉淀磁珠,弃上清)
5. 残余液体去除。将装有磁珠沉淀的离心管转入离心机,5 000 rpm,4 ℃离心 1-2 min,用移液器吸尽管中残余液体。
6. 洗脱。加入 1.2 ml Buffer LE(或 PBS 与 ddH2O),剧烈震荡(Vortex)1 min,8 000 rpm,4 ℃离心 2 min,立即将上清转移至新的无菌 EP 管中,即为纯化的慢病毒溶液。
7. 过滤。利用试剂盒提供的针式过滤器,过滤纯化的慢病毒溶液,除去杂质。
8. 纯化的慢病毒可立即用于滴度测定,或感染目的细胞,也可保存在 4 ℃(有效期 1 个月)。
9. 感染细胞时,纯化的慢病毒溶液与细胞培养液按照不同比例混合(一般情况下等比例混合),加入细胞中,并添加 polybrene 或本公司的慢病毒感染增强试剂盒(Cat:OmL-04)中的病毒感染增强试剂。
10. 慢病毒感染 24 h,换液,72 h 后观察 GFP 荧光强度或检测目的蛋白表达变化。
五、注意事项。
1. 磁珠不可冻存,否则失效。
2. 强烈建议使用本公司的慢病毒感染增强试剂盒(Cat:OmL-04)来提高慢病毒的感染效率。
3. 请使用试剂盒提供的针式过滤器过滤纯化的慢病毒溶液,不要使用常规的 0.2 μm 和 0.45 μm 孔径滤膜的滤器过滤,以免降低慢病毒滴度。
4. 纯化的慢病毒保存条件:4 ℃,一个月;-80 ℃,长期保存,但冻存后慢病毒活性降低。
5. 含慢病毒的细胞培养上清不用离心和过滤,直接用于慢病毒纯化,效果较好。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
北京奥秘佳得医药科技有限公司有强大的生物试剂研发团队,可以提供多种生物试剂,满足您科研的需要:
北京奥秘佳得医药科技有限公司是一家以新药研发为主要方向的公司,目前公司经营范围还涉及生物试剂" _href="http://www.omiget.com/index.php/product/shengwushiji.html" style="color:#000000">生物试剂的研发及销售;化工产品(不含危险化学品及一类易制毒化学品)、实验室设备及辅助设备、实验室耗材等的销售。实验室试剂主要经销的品牌有:麦克林,罗恩,乐研,艾康生物,上海源叶,普西唐以及索莱宝等,客户主要为院校以及科研院所等。经销实验室设备品牌包括:天津艾杰尔,泰斯特,海尔生物医疗,东联哈尔,群安等。耗材主要有耐思NEST、爱思进Axygen等。公司网址:http://www.omiget.com/
北京奥秘佳得医药科技有限公司
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