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基本参数
品牌 | Genenode(君诺德) | 保质期 | 12个月 |
执行标准 | 企业标准 | 生产企业 | 武汉君诺德生物技术有限公司 |
存储条件 | 室温避光保存 | 产地 | 武汉/郑州 |
官网 | www.genenode.com | 邮箱 | order@genenode.com |
BAC/PAC大型质粒提取试剂盒(溶液型,转染级)
一.产品介绍:
常规的离心柱型质粒抽提试剂盒并不适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒DNA的抽提。这主要是因为大型质粒DNA分子量很大,常常会超过100kb而且一般拷贝数低产量低,使用常规的离心柱吸附膜吸附效率和产量很低而且过膜会打断这些大分子量的质粒DNA。本试剂盒采用改进碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等DNA获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在1.5ml离心管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是100kb甚至200kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。此外溶液型的试剂可以按照比例放大缩小进行小提/中提/大提,最后可选择任意小体积溶解质粒,浓度可高达3μg/μl。
二.产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从150 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取典型产量30-50μg高纯度BAC质粒DNA,提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高,超螺旋比例高,纯度好,可直接用于转染、测序、文库等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低( 0.1 EU/μg DNA),可直接应用于细胞转染。
三.适用范围:
适用于BAC/PAC/P1/Cosmid等大型质粒制备
四.储存条件:
1.第一次使用时,将试剂盒所带全部的RNase A加入溶液P1后(终浓度100μg /ml)置于4℃保存。如果溶液P1中RNase A失活,提取的质粒可能会混杂有微量RNA残留,在溶液P1中补加RNase A即可。
2.内毒素清除剂在4℃可保存一个月,如果要长期保存,建议保存在-20℃!
3.环境温度低时溶液P2中SDS可能会析出出现浑浊或者沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
北京君诺德生物技术有限公司
联系人:
张先生
服务热线:
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公司地址:
湖北省武汉市新洲区阳逻经济开发区余泊北路99号阳逻港华中国际产业园B-F8-2
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