小反刍兽疫抗体检测试剂盒(竞争ELISA)
价格 | ¥1500.00/次 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 江苏 苏州 | 可售量 10000次 |
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货号 | CAS号 | 编号 | 包装 | 参数 | 库存 | 补货期 | 价格 |
BK2022030210 | CAS | BK2022030210 | 100 | 0 |
介绍
羊小反刍兽疫(peste des petits ruminants virus,PPRV)抗体检测试剂盒用于检测血清中的PPRV抗体,评估羊小反刍兽疫疫苗免疫状况及感染羊的血清学辅助诊断。
本试剂盒采用竞争ELISA法,在酶标板条微孔上预包被小反刍兽疫抗原。在试验中,加入待检血清以及单抗工作液,经过温育后,若样品中含有特异性抗体,则与工作液中的的抗体竞争包被板上的抗原,经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后,再加入酶标结合物,使酶与结合在板上的单抗反应,经洗涤除去未结合的酶结合物,在微孔板中加入TMB显色液,经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。
组份
1 |
抗原预包被板条 |
1/2块 |
7 |
终止液 |
15ml |
2 |
酶结合物 |
11/22ml |
8 |
阴性对照 |
900ul |
3 |
10倍浓缩洗涤液 |
100ml |
9 |
阳性对照 |
450ul |
4 |
显色液 |
11/22ml |
10 |
封板膜 |
2/4张 |
5 |
样本稀释液 |
100ml |
11 |
说明书 |
1份 |
6 |
单抗工作液 |
6/12ml |
需自备的设备及试剂
1. 微量移液器:10μl-100μl、100μl-1000μl。
2. 一次性移液器吸头。
3. 量筒:500ml。
4. 96孔板酶标仪。
5. 蒸馏水或去离子水。
6. 洗瓶或洗板机。
样品制备
取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。
洗涤液的准备
浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。
注意事项
1. 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。
2. 不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。
3. 底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。
4. TMB(显色液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。
5. 检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。
6. 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。
7. 严格遵守操作说明可以获得好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。
8. 抗原包被板为一次性用品,不得重复使用。
操作步骤
1. 每次试验均设置阳性对照1孔、阴性对照2孔。
2. 将样品稀释液按20ul/孔加入到微孔反应板内,之后将阴性对照、阳性对照、待检样品血清按30ul/孔加入孔内,再按50ul/孔加入单抗工作液,加完后震荡混匀(移液器枪头请勿混用);
3. 盖上封板膜(可按实际需要自行裁剪),置37℃温育45分钟。
4. 小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复5次,然后在干净吸水纸上拍干。
5. 每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。
6. 小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤5次, 方法同4。切记之后在干净吸水纸上拍干。
7. 每孔加显色液100μl,混匀、盖上封板膜37℃闭光显色10分钟。
8. 每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。
结果判定
用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度OD值。
试验成立的条件是:
阴性对照(N)OD值0.6,阳性对照OD值/阴性对照OD均值0.3;
计算方法:
S/N = 样品OD值/阴性对照OD均值
阴阳性判断:
S/N 0.55则判断为阴性;
S/N≤0.55则判断为阳性。
有效期
贮存方法: 2 - 8oC下贮存。
有效期: 12个月。
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苏州北科纳米科技有限公司
联系人:
杨女士
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公司地址:
苏州工业园区东旺路8号8幢2楼201室
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