氨基活化琼脂糖磁珠氨基琼脂糖微球Magarose-NH2
价格 | ¥1500.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 江苏 苏州 | 可售量 10000瓶 |
产品推荐
货号 | CAS号 | 编号 | 包装 | 参数 | 库存 | 补货期 | 价格 |
BK2021081035 | CAS | BK2021081035 | 100 | 0 |
一、概述
氨基活化琼脂糖磁珠(Magarose-NH2)是一种6%交联的磁性琼脂糖微球,磁珠在长间隔臂的末端含有反应性伯胺,含有羧基(-COOH)的分子共价偶联,用于亲和纯化。凝胶对于固定肽而言是理想的,用于抗体或其他结合配偶体的亲和纯化。
尽管其他胺反应性方法可将分子固定化在氨基活化琼脂糖磁珠上,但碳二亚胺(EDC)在交联剂中是独特的,使得能够通过-COOH偶联。在近中性至酸性pH缓冲液中,EDC能有效地与羧酸盐反应形成中间体酯,其与亲核试剂如氨基活化琼脂糖磁珠上的伯胺反应。在大多数亲和纯化方法中,分子和琼脂糖凝胶载体之间产生的酰胺键是稳定的,并且可防渗漏。
氨基活化琼脂糖磁珠也适用于通过5'-磷酸基团固定寡核苷酸。在咪唑存在下,EDC以与羧酸盐大致相同的方式有效地与磷酸基团反应。
二、产品特性
产品名称 |
Magarose-NH2 |
货号 |
PMAG018,PMAG019 |
磁珠浓度 |
25% (v/v) in 0.02% sodium azide |
配基密度 |
~ 60 μmol NH2/ ml磁珠 |
介质 |
6%交联磁性琼脂糖 |
粒径 |
20-45μm |
配体结合 |
20 mg IgG/ml磁珠 |
保存 |
常温运输,2~8℃保存一年 |
注:磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关,此处仅作参考值。
三、使用方法
1.重要产品信息
? 使用EDC时,氨基磁珠将与C-末端、天冬氨酸或谷氨酸残基的侧链-COOH相偶联。因为肽还含有伯胺(N-末端和赖氨酸残基的侧链),使用EDC的偶联将导致肽的聚合以及它们固定到凝胶支持物上。通常这种聚合对随后的亲和纯化方法无害。
? 连接水不溶性肽或其他分子时,请使用与水混溶的溶剂,如乙醇、甲醇、DMSO或DMF。首先将肽溶解在水混溶性溶剂中,然后将该溶液加入偶联缓冲液中。偶联反应中高达50%的有机溶剂浓度是相容的,除非已知肽在该浓度下变性。
? 传统上,MES缓冲液用于EDC反应,因为它不含有竞争性的胺或磷酸盐,并且有效地保持了最佳的偶联酸条件。然而,如果需要,可以替换其他缓冲液,并且偶联将有效地进行至pH 7.2。尽管磷酸盐缓冲液可以与EDC反应,但降低偶联效率。乙酸盐、Tris和甘氨酸缓冲液与EDC或O-酰基异脲中间体反应,不是合适的偶联缓冲液。另外,避免使用含有硫醇的缓冲液,这些硫醇不可逆地结合EDC并使之失活。碘化物、氯化物和溴化物等卤化物对pH值为5和7之间的EDC几乎没有影响。
? EDC / Magarose-NH2方法也可用于通过5'-磷酸基团固定寡核苷酸。
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