苏州北科纳米科技有限公司
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环氧基活化琼脂糖磁珠环氧基琼脂糖微球Magarose-Epoxy

价格 1500.00/瓶
起订量 ≥1
所在地 江苏 苏州 可售量 10000瓶

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基本参数

品牌 北科纳米 型号 齐全
加工定制 产地 江苏
公差 0.01 制作工艺 熔接
形状 条形 表面处理 电镀
适用范围 电镀


货号 CAS号 编号 包装 参数 库存 补货期 价格
BK2021081037 CAS BK2021081037 100 0

一、概述

Epoxy 活化琼脂糖磁珠(Magarose-Epoxy)是公司新开发的活化好的磁珠,它采用平均粒径为20-45μm 的6%高度交联琼脂糖凝胶,表面用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,用它合成的亲和磁珠,它避免蛋白之间位阻以及蛋白和填料的位阻干扰,使其同等配基下有更高载量,同时有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,抗体等大分子的物质,载量基本保持不变。可以在水相或者有机相中偶联,提供的该Epoxy 琼脂糖磁珠已经完全溶胀为即用凝胶磁珠。


二、产品特性

产品名称

Magarose-EpoxyMagarose-A-Epoxy

货号

PMAG014PMAG 015

磁珠浓度

25% (v/v) in 50% DMSO

配基密度

60~70 μmol Epoxy/ ml磁珠

介质

6%交联磁性琼脂糖

粒径

20-45μm

配体结合

20 mg BSA/ml磁珠

保存

2~8℃保存一年

注:磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关,此处仅作参考值。



三、使用方法

1.产品特点

w 偶联条件温和(pH8-10,温度4-45℃,时间1-16小时,可以在水相或有机相中偶联),偶联效率高(配基密度60-70 μmol/mL)。

w 磁珠不需要处理,直接计算合适的量用于偶联,缩短时间。

w 保存时间长,-20℃可以保存2年,不能够受潮。

w 刚性强,流速快(300 cm/h,100 kpa)。

w 可偶联含有氨基、巯基、羟基的多糖,蛋白,核酸,抗体等配基,应用范围广。

w 偶联后制备的亲和填料寿命长,流速快,特异性高。

2.蛋白偶联操作步骤

以用该Epoxy 琼脂糖磁珠偶联牛血清白蛋白(BSA)为例:

1) 取20 ml活化琼脂糖磁珠,磁分离,50ml去离子水洗涤三次。磁分离,去除上清。

2) 取BSA 100 mg 溶解于10 mL的pH9.0的 0.25M 碳酸钠缓冲液中。

3) 将BSA 溶液加入磁珠中混合,在摇床上振荡,25℃偶联6小时。

4) 然后加50 mg 甘氨酸,再反应6个小时封闭剩余的基团。

5) 偶联了BSA 的磁珠,用1 M NaCl 溶液洗3-5次,收集偶联后剩余的液体以及洗涤的溶液测定BSA 的总量,再用纯水洗涤磁珠3次,最后将磁珠保存在相应蛋白保存缓冲液中。

6) BSA 的偶联量为25 mg/ml. 计算方法:BSA 的吸附载量=(G0—G1)/V。

G0:BSA 总使用量,单位:mg;

G1:偶联反应后未偶联的 BSA 的量,单位:mg;

V:填料的体积,单位:mL;

注:该偶联方法可用于偶联单抗及其它蛋白,均能获得很好的偶联效果。偶联的物质如果是小分子的例如氨基酸或其他带-NH2、-SH、-OH等基团的小分子配基,那可以直接把配基加到0.05M NaOH中配置成10-20mg的溶液,其他条件不变。也可以提高偶联的温度,这样可以偶联密度更高。


3.注意事项

1) 活化的磁珠现取现用,以免时间过长造成偶联活性降低。可以-20℃密封保存,这样可以保存放2 年。如果要偶联的蛋白不稳定,可在摇床上4℃振摇偶联12-16小时,以维持配基的活性。如果没有把握可以配相应浓度的配基溶液0.5-1mL,分别选择不同pH 及温度然后不加填料模拟偶联条件,到时间观察溶液是否有沉淀,如果有沉淀偶联效果就不好,这时可以稍微降低pH 或温度,同时可以加5%左右的甘油或PEG 保护蛋白,避免沉淀,总之对于任何配基最好能了解其溶解性及稳定性,避免实验失败导致损失。

2) 偶联配基后尽快清洗磁珠,避免在高pH 条件中,配基失活。

3) 更稳定的配基可以直接溶解于NaOH 溶液或者碳酸钠溶液中进行偶联,温度可适当提高,偶联时间则相应缩短至1-4小时。

4) 偶联蛋白的最适pH 为可以在8.0-10 左右,在室温或4℃均可,温度与pH 的提高均能增加配基的吸附载量,根据蛋白的稳定选择合适的pH 和温度,偶联蛋白溶液的浓度为5-20 mg/ml。磁珠体积和配基溶液的体积为1:1.5 或者为1:2。

5) 偶联的缓冲液包括碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液,但绝对不能使用Tris、甘氨酸等含有氨基的物质。

6) 偶联的物质如果是小分子化合物,例如氨基酸或其他带-NH2、-SH、-OH 等基团的小分子配基,那可以直接把配基加到0.05 M NaOH 中配置成10-20 mg/mL 的溶液,其他条件不变。也可以提高偶联的温度,这样可以偶联密度更高。

7) 在偶联中要把磁珠能混匀完全悬浮起来即可,避免剧烈搅拌使填料有小颗粒降低流速。

8) 本试剂只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。



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