GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠GST标签蛋白纯化磁珠GSH磁珠pull down
价格 | ¥1500.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 江苏 苏州 | 可售量 10000瓶 |
产品推荐
货号 | CAS号 | 编号 | 包装 | 参数 | 库存 | 补货期 | 价格 |
BK2021081044 | CAS | BK2021081044 | 100 | 0 |
一、概述
GST融合蛋白纯化磁珠(Magarose-GSH)具有高效、快速、方便等特点,是公司针对纯化 GST 标签融合蛋白而研制的一种新型纯化介质,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步获得高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行 GST 融合蛋白的纯化。使用Magarose-GSH磁珠进行 GST Pull-down 实验,操作简单、快捷,具有传统方法无可比拟的优势。
二、产品特性
产品名称 |
Magarose-GSH |
货号 |
PMAG002 |
磁珠浓度 |
25%(v/v)in 20%乙醇 |
配基及密度 |
20-30 umol GSH/ml磁珠 |
介质 |
6%交联磁性琼脂糖 |
粒径 |
20-45μm |
配体结合 |
6-10 mg GST融合蛋白/ml磁珠 |
保存 |
2~8℃保存一年 |
三、使用方法
1.GST标签蛋白纯化
结合/洗杂液:140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH 7.4;
洗脱液:50 mM Tris-HCl,50 mM 还原型谷胱甘肽,pH 8.0; 洗脱液配制方法:0.1 M Tris 溶液 50 mL,1.535 g还原型谷胱甘肽,然后用 0.1 M 盐酸调 pH到 8.0,加去离子水至 100 mL。
磁珠使用量由用户根据目标蛋白产量和磁珠载量信息计算获得,这里仅以获得 5-10 mg 目标蛋白为例:
1.1磁珠准备:将GST纯化磁珠充分混匀,使用移液器取4 ml的磁珠悬浮液(磁珠体积为1 ml)置于离心管中,将离心管置于磁分离器上,待溶液澄清后,用移弃清液,加入去离子水反复清洗去除酒精。
1.2磁珠平衡:加入与悬浮液等体积的结合/洗杂液,用枪头反复吹打5次,将离心管置于磁分离器上,待溶液澄清后,移弃清液,重复洗2次。
1.3磁珠与蛋白结合:将GST融合蛋白裂解液加入到处理好的磁珠中,颠倒混匀,室温孵育30 min(如果目标蛋白不稳定,建议置于2-8 ℃下孵育1 h)。
1.4磁珠洗杂:置离心管于磁分离器,待溶液变澄清后,移上清液至新离心管,保留以备检测。向离心管中加入2倍悬浮液体积的结合/洗杂液,使用枪头反复吹打5次,置离心管于磁分离器,待溶液澄清,移上清液至新离心管,保留以备检测。重复洗杂步骤2次。
1.5洗脱:加入与悬浮液等体积的洗脱液,用移液器吹打5次,室温下孵育5-10 min,置于磁分离器上,待溶液澄清后,吸取上清液,即为目的蛋白组分。重复上述步骤多次,分别收集洗脱组分并留样检测,以提高目的蛋白的回收量。
1.6SDS-PAGE检测:将纯化所得样品用SDS-PAGE 检测。
注意:1. 谷胱甘肽现用现配。
2. 不同的 GST 融合蛋白与磁珠结合强弱程度不同,对大部分 GST 融合蛋白,使用含10mM 还原性谷胱甘肽的洗脱液即可洗脱目标蛋白;对少数结合能力较强的GST融合蛋白,可适当延长洗脱时间,增加洗脱次数,或提高洗脱液中还原型谷胱甘肽的浓度;
3. 结合/洗杂液和洗脱液中可添加1~5mM EDTA、1~10mM DTT、0.1~1.0%Triton X-100、0.1~1.0%Tween 20等。
1.7 磁珠清洗和保存:磁珠使用后经过简单清洗处理后,可以继续用于后续的纯化操作,也可长时间保存。用户可根据磁珠使用情况选择清洗方法,主要有:
情况1:重复使用次数较少,结合能力下降不明显时,可采用高pH和低pH Buffer交替洗涤的方式进行清洗:
w 高pH洗(碱洗):使用后的磁珠加入10 mL 清洗液A(0.1 M Tris-HCl,0.5 M NaCl,pH 8.5),漩涡振荡60 s,磁性分离,去除上清液;
w 低pH洗(酸洗):加入10 mL 清洗液B(0.1 M 醋酸钠,0.5 M NaCl,pH 4.5),漩涡振荡60 s,磁性分离,去除上清液;
w 重复碱洗、酸洗交替清洗2次,共3次。
情况2:重复使用次数较多时,由于沉淀、变性或非特异性吸附蛋白积累,导致磁珠结合目标蛋白的能力明显下降。去除沉淀或变性蛋白,可按下面的方法进行洗涤:
w 先用5 mL 6 M盐酸胍洗涤2次,每次漩涡振荡60 s,磁性分离,去除上清液;
w 再用10 mL 1X PBS洗涤3次,每次漩涡振荡60 s,磁性分离,去除上清液。
情况3:去除疏水性结合物质,可按下面方法进行洗涤:
w 先用5 mL 70%乙醇或0.1%的非离子型表面活性剂洗3次,每次漩涡60 s,磁分离,去除上清液;
w 再用10 mL 1X PBS洗涤3次,每次漩涡振荡60 s,磁分离,去除上清液。
注意:完成情况1或2的清洗后,如用户需继续使用磁珠纯化蛋白,需先用结合/洗杂液洗2~3次。如不需继续使用,则用20%乙醇洗磁珠2~3次后,再加入20%(v/v)乙醇到磁珠中使总体积为4 mL,保存于2~8°C。
2.Pull-Down操作流程
结合/洗杂Buffer:140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH7.4
洗脱Buffer:50 mM Tris-HCl, 10 mM 还原型谷胱甘肽, pH 8.0
1)磁珠准备:取适量GST纯化磁珠(磁珠体积为总体积的10%),将磁珠反复颠倒,充分混匀,使用移液器取适量的磁珠悬浮液,置于离心管中,将离心管置于磁分离器,待溶液澄清后,吸弃清液。
2) 磁珠平衡:从磁分离器上取下离心管,加入与悬浮液等体积的结合液,反复吹打5-10次,置离心管于磁分离器上,待溶液澄清后,吸弃清液,重复洗涤2次。
3) 磁珠结合靶蛋白:将含GST 标签的靶蛋白样品加入到处理好的磁珠中,颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min。
4) 磁珠洗杂:将离心管置于磁分离器,待溶液澄清后,移出上清液,保留以备取样检测。向离心管中加入2倍悬浮液体积的洗杂液,反复吹打5-10次,置离心管于磁分离器上,待溶液变澄清后,吸弃上清液,重复上述步骤2次,即得靶蛋白-磁珠复合物。
5) 目标蛋白与靶蛋白-磁珠复合物的结合:将含有目标蛋白样品加入到处理好的靶蛋白-磁珠复合物中,颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min。
6) 磁珠洗杂:将离心管置于磁分离器,待溶液澄清后,移出上清液,保留以备取样检测。向离心管中加入2倍悬浮液体积的洗杂液,反复吹打5-10次,将离心管置于磁分离器上,待溶液变澄清后,吸弃上清液。重复上述步骤2次。目标蛋白通过与靶蛋白的结合,从混合体系中被捕获。
7) 目的蛋白的洗脱:在上述离心管中加入与悬浮液等体积的洗脱液,用移液器吹打5次, 然后在室温下置于翻转混合仪或者手动轻轻翻转离心管,5-10 min后,置于磁分离器上,待溶液变澄清后,吸取上清液,收集洗脱组分,即得到靶蛋白和目标蛋白复合物。也可以再重复操作一次,分别收集洗脱组分,留待检测。
3.注意事项
1) 磁珠使用和保存过程中应避免冷冻、干燥和高速离心等操作;
2) 使用本产品前,请务必充分振荡使磁珠保持均匀的悬浮状态;
3) 磁珠与溶液混合过程中,如果溶液粘稠无法通过翻转离心管重悬磁珠,可采用移液器反复吹吸或短时漩涡混合使磁珠充分重悬;
4) 用户可根据实际需要保留经磁性分离移去的上清液,进行取样检测,以便分析纯化过程和优化蛋白纯化流程;
5) 本产品可重复使用,重复使用时,建议纯化同种蛋白,纯化不同种类的蛋白时,建议使用新的磁珠,以防交叉污染;
6) 本产品需与磁性分离器配套使用;
本试剂盒只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。温馨提示:苏州北科震泽供应产品仅用于科研,不能用于人体,部分网站示意图源自互联网,图片仅供参考,请以实际测试结果为准,如有侵权请联系我们立即删除。 |
苏州北科纳米科技有限公司

联系人:
杨女士

服务热线:
류텹욒퀕텹욒퀕
류텹욒퀕텹욒퀕

公司地址:
苏州工业园区东旺路8号8幢2楼201室
GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠GST标签蛋白纯化磁珠GSH磁珠pull down相关产品
- 工厂直销 铜箔 铝箔 云母片 电子灯饰电子电器等电子配件加工定制
- OTC数字逆变一级代理商气保电焊机 CPDP500
- 中心供氧汇流排_供应产品_江苏众力流体装备有限公司
- AB型防爆胶泥
- 现货供应 平衡块 镀锌加重铁块3mm厚 陀螺配重块 家电加重铁 铁块 铅块 动平衡块 定制出口
- 厂家供应30g配重平衡块 37*19*6mm玩具配重块 电子产品加重块 支持定制出口 直销
- 现货供应25g配重块 轮胎平衡 玩具加重铁30*19*6 可定制 厂家直销
- 现货供应10g配重块 定制加重块 26*12.5*4mm 多种规格批发
- 现货供应 10g直角配重块 镀锌 19.5*18.5*3.2mm 可定制 厂家批发
- 批发 风扇配重块 玩具平衡块 台灯配重块 出口 鼠标配重块 配种 窗帘 配重铁大全厂家 定制
- 爆款 5g直角配重块鼠标 多种规格 镀锌 玩具加重块 配重块厂家 跳绳加重片 可定制
- 现货供应10g圆角配重块镀锌铸铁加重块粘贴式平衡块多种规格可定制加重铁块 厂家直销
- 特价供应原装进口端子排X20TB1F
- 武汉百士供应原装端子排X20TB12
- DURGOGT-77安全阀MASRERCOOLMSC53500-C现货VIVOILX1P250
- ITALVIBRASMVSI15/1410-S02现货Cell-Con452241-SB
- 呼伦贝尔市扣式电池壳CR203205mm垫片弹片厂家直销
- 邵阳市纽扣/扣式电池壳CR203215810mm垫片弹片304不锈钢材质
猜你在找
- 二维材料-羟基磷灰石(HAP)超长纳米线 纳米管 纳米颗粒 纳米棒 生物试剂纳米材料 纳米医学服务材料合成定制
- MBene-二维过渡金属材料 二维薄膜 磁珠 CVD 发光材料 生物纳米材料合成异质结定制
- 精磨氧化锆陶瓷 高精度氧化锆陶瓷件产品 宜兴赛硕
- 生产高品质氧化锆陶瓷零配件 高温烧制陶瓷棒厂家 宜兴赛硕
- COFs共价有机化合物-COF单体2,2’-联吡啶-5,5’-二甲醛 纳米材料-量子点-分子筛 生物材料合成定制
- MOFs金属有机框架化合物-MOF配体材料间-四(对 - 溴苯基)卟啉 Mxenes材料 纳米医学服务材料合成定制
- 单层/少层/多层Ti2SnC 胶体水溶液 -MXenes材料 粉末 颗粒 生物材料定制 二维材料合成定制
- Mxene二维材料-氧化锰/蛋白/氧化铈纳米酶系列 生物纳米材料合成 医学纳米服务定制
- MXene 二维材料-石墨烯水凝胶(还原法)碳纳米材料 石墨烯分散液 二维纳米生物医学定制材料合成
- 纳米材料Mxene-纤维素复合石墨烯气凝胶单层/少层/多层石墨烯材料 碳气水凝胶 生物医学材料定制合成
- 定制氧化锆陶瓷棒氧化铝陶瓷管带槽陶瓷条陶瓷结构件耐磨抗压赛硕
- CVD 二硒化钼MoSe2 孤立晶粒蓝宝石(单面抛光)蓝宝石(双面抛光)可开票
免责声明:以上展示的GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠GST标签蛋白纯化磁珠GSH磁珠pull down信息由苏州北科纳米科技有限公司自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责,
全球塑胶网对此不承担责任。
风险防范建议:为保障您的利益,建议优先选择速购通会员
手机版:GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠GST标签蛋白纯化磁珠GSH磁珠pull down
更新产品链接为:https://www.51pla.com/html/sellinfo/485/48502912.htm
发送询价单