生物试剂猪蓝耳荧光定量PCR检测试剂盒
| 价格 | ￥2200.00/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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猪蓝耳病毒荧光定量PCR检测试剂盒说明书
50头份/盒
作用与用途：
用于猪脾脏、淋巴结、肉品、血液及血液制品中猪蓝耳病毒核酸的检测。
用法与判定：
使用病毒DNA/RNA核酸提取试剂盒提取核酸，按照如下步骤操作：
荧光PCR反应体系的配置：取出试剂盒中的各组分，置室温（15-25℃）融化后瞬时离心，备用。每次检验设阴、阳性对照。设待检样品、阳性对照和阴性对照的样品总份数为n，按如下反应体系配置：：
酶系one-step RT-qPCR Mix
|
1.5ul x（n+1）
|
5x one-step RT-qPCR Buffer
|
5ul x（n+1）
|
引物探针预混液
|
7.5ul x（n+1）
|
总量
|
25ul x（n+1）
|
将以上配置的反应体系充分混匀后，按25ul/管分装至反应管中。分别取提取的核酸样品5ul加入相应反应管中，盖紧管盖后瞬时离心。
1.荧光PCR反应条件：
温度
|
时间
|
循环数
|
说明
|
是否收集信号
|
45℃
|
15 min
|
1
|
反转录
|
否
|
95℃
|
3min
|
1cycle
|
预变性
|
否
|
95℃
|
15sec
|
40-45cycle
|
变性
|
否
|
60℃
|
30sec
|
退火，延伸
|
是（FAM）
|
对于ABI荧光PCR仪，选择FAM通道读取检测结果，淬灭基团选择“MGB”；
对于其它品牌的荧光PCR仪，选择FAM通道读取检测结果，淬灭基团选择“None”
本产品使用特殊的ROX Reference Dye，适用于所用qPCR仪器，无需在不同的仪器上调整ROX的浓度。
2.试验成立条件：阳性对照Ct值≤35并出现典型的扩增曲线，阴性对照无Ct值或无典型的扩增曲线，则判为试验成立。
3.判定：待检测样品Ct值≤35并出现典型的扩增曲线，判为阳性；待检样品无Ct值或35＜Ct值≤40并且无典型的扩增曲线，判为阴性。
注意事项
1.试剂盒应在-20℃以下保存和运输。
2.本试剂盒仅用于科研检测使用，操作人员必须经过培训，试剂盒使用前请仔细阅读说明书全文。
3.不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。
4.使用时尽量避免反复冻融，如冻融，应不超过3次。
5.样品采集和处理过程应戴一次性手套，并及时更换，样品间严禁交叉污染。
6.荧光PCR实验严格分区操作，各区应有专用的手套、移液器等，不得交叉使用，避免污染；工作人员应遵循单方向工作原则，各工作区相对隔离。
7.进行荧光PCR实验的工作桌面及相关物品应定期用1%次氯酸钠、75%酒精、1mol/L盐酸依次和，或定期用紫外灯和。
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