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生物试剂病毒DNA提取试剂盒（磁珠法）100T

价格	￥890.00/盒
起订量	≥1
所在地	上海上海	可售量 10000盒

联系人：卢经理

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基本参数

纯度	/	规格	KB052-100T
品牌	伊势久生物	产品名称	病毒DNA提取试剂盒（磁珠法）100T
名称	病毒DNA提取试剂盒（磁珠法）100T

非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测试剂盒说明书（探针法）

50头份/盒

作用与用途：

用于猪脾脏、淋巴结、肉品、血液及血液制品中病毒核酸的检测。

用法与判定：

1.用法

1.1样品处理:以下样品处理后置60℃灭活30分钟。

1.1.1组织样品:取100mg-200mg待检组织样品（脾脏、淋巴结、肉品），用研钵或者组织匀浆仪充分研磨匀浆后，加入1ml PBS（pH7.2）混匀；然后以1000r/min离心3分钟，吸取200ul上清，置于1.5ml离心管中，编号备用。

1.1.2血液:采集抗凝血，吸取200ul，置1.5ml离心管中，编号备用。

1.1.3血液制品:取100mg-200mg待检血液制品（如血浆蛋白粉），置于1.5ml离心管中，加入1ml PBS（pH7.2），充分混匀震荡后，以10000r/min离心3分钟，吸取200ul上清，置于1.5ml离心管中，编号备用。

1.2样品存放:采集或处理好的样品在2-8℃保存应不超过24小时；若需长期保存，须放置-70℃以下冰箱，并应避免反复冻融。

1.3 DNA提取:用商品化试剂盒按其说明书，对处理好的样品提取DNA。

1.4 荧光PCR反应体系的配置:取出试剂盒中的各组分，置室温（15-25℃）融化后瞬时离心，备用。每次检验设阴、阳性对照。设待检样品、阳性对照和阴性对照的样品总份数为n，按如下反应体系配置：

2 X qPCR Mix	12.5ul x（n+1）
引物探针预混液	7.5ul x（n+1）
总量	20ul x（n+1）

将以上配置的反应体系充分混匀后，按20ul/管分装至反应管中。分别取DNA样品5ul加入相应反应管中，盖紧管盖后瞬时离心。

1.5 荧光PCR反应条件：

温度	时间	循环数	说明	是否收集信号
95℃	3min	1cycle	预变性	否
95℃	15sec	40-45cycle	变性	否
60℃	30sec	40-45cycle	退火，延伸	是（FAM）

对于ABI荧光PCR仪，选择FAM通道读取检测结果，淬灭基团选择“MGB”；

对于其它品牌的荧光PCR仪，选择FAM通道读取检测结果，淬灭基团选择“None”

本产品使用特殊的ROX Reference Dye，适用于所用qPCR仪器，无需在不同的仪器上调整ROX的浓度。

2.试验成立条件:

阳性对照Ct值≤35并出现典型的扩增曲线，阴性对照无Ct值或无典型的扩增曲线，则判为试验成立。

3.判定:

待检测样品Ct值≤35并出现典型的扩增曲线，判为阳性；待检样品无Ct值或35＜Ct值≤40并且无典型的扩增曲线，判为阴性。

注意事项

1.试剂盒应在-20℃以下保存和运输。

2.本试剂盒仅用于科研检测使用，操作人员必须经过培训，试剂盒使用前请仔细阅读说明书全文。

3.不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。

4.使用时尽量避免反复冻融，如冻融，应不超过3次。

5.样品采集和处理过程应戴一次性手套，并及时更换，样品间严禁交叉污染。

6.荧光PCR实验严格分区操作，各区应有专用的手套、移液器等，不得交叉使用，避免污染；工作人员应遵循单方向工作原则，各工作区相对隔离。

7.进行荧光PCR实验的工作桌面及相关物品应定期用1%次氯酸钠、75%酒精、1mol/L盐酸依次灭菌和消毒，或定期用紫外灯灭菌和消毒。

8.测试样品时，应做好生物安全防护。

9.试验完毕后，使用过的试剂盒、样品和试剂应进行无害化处理。

联系方式

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联系人：

卢经理

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公司地址：

太阳山路188弄2号101

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