伊势久生物试剂 抗坏血酸氧化酶(AAO)试剂盒 科研用
价格 | ¥130/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 100瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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所在地区:上海 上海市
主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | KE003-48T |
品牌 | 伊势久生物 | 产品名称 | 抗坏血酸氧化酶(AAO)试剂盒 |
名称 | 抗坏血酸氧化酶(AAO)试剂盒 | 包装 | 瓶 |
性状 | 液体 | 用途 | 生化研究 |
储存 | 4℃ | 产品规格 | 48T |
抗坏血酸氧化酶(AAO)试剂盒
产品简介:
AAO 是定位于植物细胞壁的糖蛋白,属“蓝铜氧化酶”家族。细胞壁内的抗坏血酸和 AAO 与细胞壁代谢和生长有着密切的联系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通过质膜上的细胞色素 b 还原,该过程中电子的跨膜运输能够促进细胞生长。 AAO 可直接氧化 AsA,通过测定 AsA 的氧化量,可计算得 AAO 活力。
实验中所需仪器及设备:
低温离心机、紫外分光光度计、1ml 石英比色皿、可调式移液器、研钵、冰、蒸馏水。
组成:
产品名称 |
KE003-48T |
Storage |
试剂一 |
60ml |
4℃ |
试剂二 |
50ml |
4℃ |
试剂三 |
粉剂×1瓶 |
4℃ |
临用前加入10ml蒸馏水充分溶解。 |
||
说明书 |
一份 |
操作步骤(仅供参考):
一、粗酶液提取:
按照组织质量g:试剂一体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心10min,取上清置冰上待测。
二、AAO测定操作:
1.分光光度计预热30min,调节波长到265nm。
2.试剂二在25℃水浴锅中预热30min。
3.空白管:依次在1ml石英比色皿中加入100μl蒸馏水、850μl预热的试剂二和50μl试剂三,迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收A1和A2,△A空白管=A1-A2。
测定管:依次在1ml石英比色皿中加入100μl上清液、850μl预热的试剂二和50μl试剂三,迅速混匀后在265nm测定10s和130s光吸收A3和A4,△A测定管=A3-A4。
三、AAO活性计算:
(1)按蛋白浓度计算AAO活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1μmolAsA为1U。AAO(U/mgprot)=(△A测定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反总×106÷(Cpr×V样)÷T=0.0924×(△A测定管-△A空白管)÷Cpr(2)按样本质量计算AAO活性单位定义:25℃中每毫克样本每分钟氧化1μmolAsA为1U。AAO(U/g)=(△A测定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反总×106÷(W×V样÷V样总)÷T=0.0924×(△A测定管-△A空白管)÷Wε:AsA在265nm处摩尔吸光系数为5.42×104L/mol/cm;d:比色皿光径(cm),1cm;V反总:反应体系总体(L),1000μl=1×10-3L;106:1mol=1×106μmol;Cpr:上清液蛋白质浓度(mg/ml),需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;V样:加入反应体系中上清液体(ml),100μl=0.1ml;V样总:加入提取液体,1ml;W,样本质量,g;T:催化反应时间(min),2min。
注意事项:
1、本产品仅供科研使用,严禁它用。
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