伊势久生物生化试剂 NP-40裂解液 科研用 100ml 500ml
| 价格 | ￥145/瓶 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 100瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | PC004-100ml |
| 品牌 | 伊势久生物 | 产品名称 | NP-40裂解液 |
| 名称 | NP-40裂解液 | 包装 | 瓶 |
| 性状 | 液体 | 用途 | 生化研究 |
| 储存 | -20℃ | 有效期 | 1年 |
NP-40裂解液
简介：
有很多种成分都可以从细胞中提取蛋白，例如Triton、SDS、NP-40等。NP-40是Nonidet P 40的缩写，也叫乙基苯基聚乙二醇，是一种温和的非离子型去垢剂，1%浓度基本可以破坏掉细胞膜，而对核膜的破坏作用较弱，结合特定的缓冲液可以获得胞浆蛋白。与蛋白结合力强，用于防止物质分子疏水间相互作用，确保蛋白的充分溶解和结构稳定，尤其用于膜蛋白的非变性条件下的溶解。
伊势久NP-40裂解液主要由Tris-HCl、NaCl、NP-40以及sodium pyropho-sphate，β-glycerophosphate，sodium fluoride，EDTA等多种蛋白酶抑制剂组成。经过NP-40裂解液裂解后得到的蛋白，可以用BCA蛋白定量试剂盒和Bradford蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。该产品仅适用于科研实验，不可做他用。
组成：
|
|
|
Storage |
NP-40裂解液 |
|
500ml |
-20℃ |
保存条件：
-20℃，12个月有效。
操作步骤（仅供参考）：
(一)贴壁培养细胞
1、 取NP-40 Lysis Buffer置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。
2、 去除贴壁细胞的培养液，低速离心，弃上清。
3、 按照6孔板每孔加入150～250μl含PMSF的裂液的比例，加入NP-40 Lysis。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或4℃裂15～30min。
4、 4℃离心（如无低温离心机，室温下离心亦可），取上清。
5、进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(二)悬浮培养细胞
1、 取NP-40 Lysis Buffer置于室温溶解混匀，PMSF终浓度为1mM。低速离心悬浮细胞，弃上清液，手机沉淀。
2、 用手指轻弹细胞，使其松散。按照6孔板每孔细胞加入150～200μl含有PMSF的裂解的比例，加入 NP-40 Lysis Buffer 。
3、4℃离心5～10min(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
4、 进行后续的SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
(三)组织样本
1、 取NP-40 Lysis Buffer置于室温溶解混匀，使PMSF终浓度为1mM。把组织剪切成细小的碎片，越小越好。
2、 取在液氮或超低温冰箱中冷冻30min以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控制之内，以减少蛋白的降解。
3、 按照每20mg组织加入150～250μl裂解液的比例加入含有PMSF的裂解液。冰上或4℃裂解。
4、 4℃离心(如无低温离心机，室温下离心亦可)，取上清。
5、 进行后续的 PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
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