伊势久生物生化试剂 SDS裂解液 科研用
价格 | ¥140/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 100瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | PC007-100ml |
品牌 | 伊势久生物 | 产品名称 | SDS裂解液 |
名称 | SDS裂解液 | 包装 | 瓶 |
性状 | 液体 | 用途 | 生化研究 |
储存 | -20℃ | 有效期 | 1年 |
SDS裂解液
简介:
多种成分均可以从细胞中提取总蛋白,例如Triton、SDS、NP-40等。SDS裂解液 (SDS Lysis Buffer)是一种极其强烈的细胞组织快速裂解液并获得总蛋白质。其裂解液强度大于NP-40裂解液、、RIPA裂解液(弱)、RIPA裂解液(中)、通用细胞裂解液、Western及IP细胞裂解液,所获得的蛋白质可以用于Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等。SDS Lysis Buffer主要由Tris-HCl、NaCl、SDS等组成,并含有多种蛋白酶抑制剂成分,可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
组成:
产品名称 |
PC007-100ml |
PC007-500ml |
Storage |
SDS Lysis Buffer |
100ml |
500ml |
-20℃ |
说明书 |
一份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
操作步骤(仅供参考):
一)贴壁培养细胞
1、取SDS Lysis Buffe室温溶解混匀,使用前取适量裂解液加入PMSF,使终浓度为1mM。
2、去除贴壁细胞的培养液,低速离心,弃上清,留取沉淀。
3、按照6孔板每孔加入150~250μl含有PMSF的裂解液的比例加入SDS Lysis Buffer 。移液器轻轻吹打,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液作用于细胞内,细胞就会被裂解/如果是所提蛋白样品用于CHIP, 应置于冰上或4℃裂解。
4、离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
5、进行后续的Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等操作。
二)悬浮培养细胞
1、取SDS Lysis Buffer置于室温溶解混匀后,使用前取适量裂解液加入PMSF,使其最终浓度为1mM。
2、低速离心悬浮细胞,弃上清,收集沉淀。
3、用手指轻弹细胞,使其松散。按照6孔板每孔细胞加入150~250μl含有PMSF的裂解液的比例,加入SDS Lysis Buffer。
4、4℃离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
5、进行后续的Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等操作。
三)组织样本
1、取SDS Lysis Buffer 置于室温溶解混匀,使用前取适量裂解液加入PMSF,使其最终浓度为1mM。
2、把组织剪切成细小的碎片,越小越好。
3、取在液氮或超低温冰箱中冷冻以上的组织,迅速用液氮研磨,研磨过程尽量控制在1~2min之内,以减少蛋白的降解。
3、按20mg组织加入150~250μl裂解液的比例加入含有PMSF的裂解液。冰上或4℃裂解。
4、离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。
5、进行后续的Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等操作。
注意事项:
1、去除贴壁细胞的培养液后,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。
2、如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
3、在培养细胞的裂解中,如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/离心管,然后再裂解。少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接粗,相对比较容易裂解充分。
4、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈Vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。
5、溶解SDS Lysis Buffer时,应尽量缩短溶解时间,避免裂解液中的有效成分失效。
6、细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或4℃进行。
7、本产品仅供科研使用,严禁它用。
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