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伊势久生物生化试剂 SDS裂解液 科研用

价格 140/瓶
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基本参数

纯度 / 规格 PC007-100ml
品牌 伊势久生物 产品名称 SDS裂解液
名称 SDS裂解液 包装
性状 液体 用途 生化研究
储存 -20℃ 有效期 1年

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SDS裂解液

简介:

多种成分均可以从细胞中提取总蛋白,例如TritonSDSNP-40等。SDS裂解液 (SDS Lysis Buffer)是一种极其强烈的细胞组织快速裂解液并获得总蛋白质。其裂解液强度大于NP-40裂解液、、RIPA裂解液()RIPA裂解液()、通用细胞裂解液、WesternIP细胞裂解液,所获得的蛋白质可以用于Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等。SDS Lysis Buffer主要由Tris-HClNaClSDS等组成,并含有多种蛋白酶抑制剂成分,可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。

组成:

产品名称

PC007-100ml

PC007-500ml

Storage

SDS Lysis Buffer

100ml

500ml

-20℃

说明书

一份

保存条件:

-20℃保存,一年有效

操作步骤(仅供参考)

)贴壁培养细胞

1、取SDS Lysis Buffe室温溶解混匀,使用前取适量裂解液加入PMSF,使终浓度为1mM

2、去除贴壁细胞的培养液,低速离心,弃上清,留取沉淀。

3、按照6孔板每孔加入150250μl含有PMSF的裂解液的比例加入SDS Lysis Buffer 。移液器轻轻吹打,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液作用于细胞内,细胞就会被裂解/如果是所提蛋白样品用于CHIP, 应置于冰上或4℃裂解。

4、离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。

5、进行后续的Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等操作。

)悬浮培养细胞

1、取SDS Lysis Buffer置于室温溶解混匀后,使用前取适量裂解液加入PMSF,使其最终浓度为1mM

2、低速离心悬浮细胞,弃上清,收集沉淀。

3、用手指轻弹细胞,使其松散。按照6孔板每孔细胞加入150250μl含有PMSF的裂解液的比例,加入SDS Lysis Buffer

44℃离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。

5、进行后续的Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等操作。

)组织样本

1、取SDS Lysis Buffer 置于室温溶解混匀,使用前取适量裂解液加入PMSF,使其最终浓度为1mM

2、把组织剪切成细小的碎片,越小越好。

3、取在液氮或超低温冰箱中冷冻以上的组织,迅速用液氮研磨,研磨过程尽量控制在12min之内,以减少蛋白的降解。

3、按20mg组织加入150250μl裂解液的比例加入含有PMSF的裂解液。冰上或4℃裂解。

4、离心(如无低温离心机,室温下离心亦可),取上清。

5、进行后续的Western、染色质免疫共沉淀(ChIP)等操作。

注意事项:

1、去除贴壁细胞的培养液后,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。

2、如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。

3、在培养细胞的裂解中,如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/离心管,然后再裂解。少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接粗,相对比较容易裂解充分。

4、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈Vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。

5、溶解SDS Lysis Buffer时,应尽量缩短溶解时间,避免裂解液中的有效成分失效。

6、细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或4℃进行。

7、本产品仅供科研使用,严禁它用。

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