NHS-琼脂糖凝胶FF
价格 | ¥1500.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 江苏 苏州 | 可售量 10000瓶 |
产品推荐
货号 | CAS号 | 编号 | 包装 | 参数 | 库存 | 补货期 | 价格 |
BK-NRPB11L-10 | CAS | BK-NRPB11L | 10mL | 100 | 750 | ||
BK-NRPB11L-100 | CAS | BK-NRPB11L | 100mL | 100 | 5250 | ||
BK-NRPB11L-500 | CAS | BK-NRPB11L | 500ml | 100 | 22500 |
品 名:NHS-琼脂糖凝胶FF
英文名:NHS Activated NUPharose Fast Flow, NHS NUPharose FF
目录号:NRPB11L
规 格:1ml,10 ml,100 ml,1L,特殊规格订制
运 输:2 ~ 25℃,常压、避光
贮 存:100%异丙醇,-20℃
保质期:1年
相关介绍:
NHS-琼脂糖凝胶FF是一种将琼脂糖凝胶微球用NHS活化形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有载量高,非特异性吸附少,流速快等特点。本活化的琼脂糖凝胶能温和的与氨基基团反应,特别适合偶联抗体、链霉亲和素、酶、核酸等功能性生物大分子。
技术指标:
外观 |
乳白色半透明凝胶状凝胶 |
基质 |
4%琼脂糖凝胶 |
配体 |
NHS |
配体密度 |
≥15μmol/mL |
蛋白质载量 |
≥10mg/ml IgG |
耐反压 |
0.3 MPa |
粒径范围 |
60~180μm |
工作温度 |
4~40℃ |
基质pH稳定性 |
3~12(长时间);2~14(短时间) |
基质化学稳定性 |
在以下溶液中稳定:常用的水相缓冲液;1mol/L NaOH;1mol/L乙酸(pH4.0);6mol/L盐酸胍;70%乙醇。 |
应用实例:
实验名称:NHS-琼脂糖凝胶FF偶联抗体。
实验步骤:
1. 配制抗体:取100 mg IgG加10 ml 偶联缓冲液(0.2 M NaHCO3, 0.5 M NaCl, pH 8.3)溶解,留0.1 ml以便测定偶联效率。
2. 偶联反应:取10 ml NHS-琼脂糖凝胶FF,用50 ml 1 mM HCl分三次清洗去除保存液,清洗后立即加入抗体偶联溶液中,4℃,震荡反应6 小时或者过夜,进行偶联反应。
3. 封闭:滤出反应液,用50 ml偶联缓冲液清洗偶联后的凝胶,然后用10 ml封闭缓冲液(0.2 M NaHCO3, 0.5 M NaCl, 0.5 M 乙醇胺, pH 8.3),室温震荡4 小时(或者过夜)封闭未偶联的基团,封闭后用20 ml蒸馏水洗干净即可。
4. 检测:偶联前后的反应液用SDS-PAGE检测对比偶联效率,偶联好的填料根据配基特性测定功能和载量。
注意事项:
1. 如果配基的稳定性不了解,可以选择不同pH的缓冲液和温度,用配基相应浓度的溶液0.5 ~ 1 ml,不加填料模拟偶联条件,观察溶液是否会产生沉淀。有沉淀产生对应的偶联效果就不好,可以稍微降低pH或温度,同时可以加5%左右的甘油或PEG保护蛋白,避免产生沉淀,总之对于任何配基最好能了解其溶解性及稳定性,避免实验失败导致损失。
2. 如果偶联的配基不稳定,可在摇床上4℃振摇偶联1 ~ 12小时,以维持配基的活性。偶联配基后尽快清洗填料,避免在高pH 条件中,配基失活。
3. 更稳定的配基可以直接溶解于0.2 M碳酸氢钠,可适当提高温度,如室温,偶联时间则相应可缩短至1 ~ 2 小时。
4. 偶联蛋白的较适pH为7.5 ~ 9.0,在室温或4℃均可,提高温度能增加配基的偶联效率,根据蛋白的稳定性选择合适的pH 和温度。偶联蛋白溶液的浓度以5 ~ 15 mg/ml较佳。凝胶体积和配基溶液的体积比以1:0.5 ~ 1:2.0较佳。
5. 偶联的缓冲液可以是碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液,但绝对不能使用氨基的缓冲体系,如Tris-HCl缓冲液。
6. 封闭的缓冲液一般使用带氨基的小分子试剂,如乙醇胺、Tris等,pH在8 ~ 9室温封闭数小时可完全封闭。推荐的封闭缓冲液为0.5 M 乙醇胺,0.5 M NaCl,pH 8.3或0.1 M Tris-HCl,pH 8.5。
7. 在偶联中尽量使用温和的混匀方式,如震荡、翻转、旋转等。如使用磁力搅拌器或者机械搅拌,需要降低搅拌的速度,只要把填料能混匀完全悬浮起来即可,避免剧烈搅拌使凝胶微球破碎。
8. NHS-琼脂糖凝胶FF需现取现用,避免时间过长造成活性降低。
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苏州北科纳米科技有限公司

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公司地址:
苏州工业园区东旺路8号8幢2楼201室
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