伊势久生物试剂 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 科研用 30T 150T
价格 | ¥165/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 100瓶 |
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所在地区:上海 上海市
主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | PE017-30T |
品牌 | 伊势久生物 | 产品名称 | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 |
名称 | SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 | 包装 | 瓶 |
性状 | 液体 | 用途 | 生化研究 |
储存 | 常温保存 | 有效期 | 1年 |
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒
简介:
聚丙烯酰胺凝胶电泳(Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE),其原理在于聚丙烯酰胺凝胶为网状结构,具有分子筛效应。它有两种形式:非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE);非变性聚丙烯酰胺凝胶,在电泳的过程中,蛋白质能够保持完整状态,并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开,主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。
SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE 凝胶,也可配制非变性(native)PAGE 凝胶,具体配制的量应根据器具大小决定。
组成:
产品名称 |
PE017-30T |
PE017-150T |
Storage |
试剂(A):30% Acr-Bis (29:1) |
100ml |
500ml |
4℃避光 |
试剂(B):1.5M Tris-HCl(pH8.8) |
100ml |
500ml |
RT |
试剂(C):1.5M Tris-HCl(Ph6.8) |
30ml |
150ml |
RT |
试剂(D):10% SDS |
5ml |
25ml |
RT |
试剂(E):Ammonium persulfate (过硫酸铵) |
0.5g |
2.5g |
RT |
试剂(F):TEMED |
1ml |
5ml |
4℃避光 |
说明书 |
一份 |
保存条件:。
常温保存,一年有效。
操作步骤(仅供参考):
1、配制 10%过硫酸铵:直接在Ammonium Persulfate 中加入蒸馏水,充分溶解,分装 成小份储存于-20℃或 4℃。
注意:一般用 1.5mlEP 管分装成 0.5-1ml 每支,-20 ℃ 保存,每支使用 2-3 次即弃用。短期使用时,可保存于 4℃,1周有效。
2、根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度,按照下表配制分离胶(下层胶):
不同浓度的SDS-PAGE 分离胶的最佳分离范围:
SDS-PAGE 分离胶浓度 |
最佳分离范围 |
6%胶 |
50-150kD |
8%胶 |
30-90kD |
10%胶 |
20-80kD |
12%胶 |
12-60kD |
15%胶 |
10-40kD |
成分 |
配制不同体积SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) |
|||||
6%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
蒸馏水 |
2.7 |
5.4 |
8.1 |
10.8 |
16.2 |
27 |
30% Acr-Bis (29:1) |
1.0 |
2.0 |
3.0 |
4.0 |
5.0 |
6.0 |
1.5M Tris-HCl(pH8.8) |
1.25 |
2.5 |
3.75 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
TEMED |
0.004 |
0.008 |
0.012 |
0.016 |
0.024 |
0.04 |
成分 |
配制不同体积SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) |
|||||
8%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
蒸馏水 |
2.4 |
4.7 |
7.1 |
9.5 |
14.2 |
23.7 |
30% Acr-Bis (29:1) |
1.3 |
2.7 |
4.0 |
5.3 |
8.0 |
13.3 |
1.5M Tris-HCl(pH8.8) |
1.25 |
2.5 |
3.75 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
TEMED |
0.003 |
0.006 |
0.009 |
0.012 |
0.018 |
0.03 |
成分 |
配制不同体积SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) |
|||||
10%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
蒸馏水 |
2.0 |
4.1 |
6.1 |
8.1 |
12.2 |
20.3 |
30% Acr-Bis (29:1) |
1.7 |
3.3 |
5.0 |
6.7 |
10.0 |
16.7 |
1.5M Tris-HCl(pH8.8) |
1.25 |
2.5 |
3.75 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.012 |
0.02 |
成分 |
配制不同体积SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) |
|||||
12%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
蒸馏水 |
1.7 |
3.4 |
5.1 |
6.8 |
10.2 |
17 |
30% Acr-Bis (29:1) |
2.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
12.0 |
20.0 |
1.5M Tris-HCl(pH8.8) |
1.25 |
2.5 |
3.75 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.012 |
0.02 |
成分 |
配制不同体积SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) |
|||||
15%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
蒸馏水 |
1.2 |
2.4 |
3.6 |
4.8 |
7.2 |
12.0 |
30% Acr-Bis (29:1) |
2.5 |
5.0 |
7.5 |
10.0 |
15.0 |
25 |
1.5M Tris-HCl(pH8.8) |
1.25 |
2.5 |
3.75 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
10% SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
TEMED |
0.002 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.012 |
0.02 |
按照如下表格配制SDS-PAGE 的浓缩胶(也称堆积胶/积层胶或上层胶):
成分 |
配制不同体积SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(ml) |
||||||
5%胶 |
1 |
2 |
3 |
4 |
6 |
8 |
10 |
蒸馏水 |
0.68 |
1.4 |
2.1 |
2.7 |
4.1 |
5.5 |
6.8 |
30% Acr-Bis (29:1) |
0.17 |
0.33 |
0.5 |
0.67 |
1.0 |
1.3 |
1.7 |
1.5M Tris-HCl(pH6.8) |
0.13 |
0.25 |
0.38 |
0.5 |
0.75 |
1.0 |
1.25 |
10% SDS |
0.01 |
0.02 |
0.03 |
0.04 |
0.06 |
0.08 |
0.1 |
10%过硫酸铵 |
0.01 |
0.02 |
0.03 |
0.04 |
0.06 |
0.08 |
0.1 |
TEMED |
0.001 |
0.002 |
0.003 |
0.004 |
0.006 |
0.080 |
0.01 |
注意事项:
1、过硫酸铵配制成 10%溶液后应当-20℃保存。应尽量减少室温存放时间以防失效。有效 避免失效的方法是分成小份,-20℃保存,用 2~3 次,剩余的弃用,亦可 4℃保存几天。
2、TEMED 易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切, 可 通过适当调节TEMED 的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3、配制聚丙烯凝胶的过程中,如果室温较低,可以置于 37℃放置,加速凝固。
4、30%Acr-Bis(29:1)有轻微神经毒性,请小心操作。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、本产品仅供科研使用,严禁它用。
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