伊势久生物 生化试剂 MTT溶液(5mg/ml) 科研用
价格 | ¥75/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 100瓶 |
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纯度 | / | 规格 | CD003-1ml |
品牌 | 伊势久生物 | 产品名称 | MTT溶液(5mg/ml) |
名称 | MTT溶液(5mg/ml) | 包装 | 瓶 |
性状 | 液体 | 用途 | 生化研究 |
储存 | -20℃避光 | 有效期 | 18个月 |
MTT溶液(5mg/ml)
简介:
MTT全称为3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,是一种黄颜色的染料。MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。在特定溶剂(如DMSO)存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。通过OD值的大小,可以判断活细胞的数量或活性,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与活细胞的数量或活性成正比。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
组成:
产品名称 |
CD003-10ml |
Storage |
MTT solution(5mg/ml) |
10ml |
-20℃避光 |
说明书 |
一份 |
保存条件:
-20℃避光保存,18个月有效期。
操作步骤(仅供参考):
1、 细胞用含血清的培养液培养至对数生长期,常规胰蛋白酶消化液消化细胞(悬浮细胞无需消化)。
2、 低速离心,收集细胞沉淀。
3、 用培养液重悬细胞沉淀,制备成单细胞悬液,并计数。
4、 细胞接种于96孔培养板,一般接种密度为3000~10000 /孔。通常细胞增殖实验每孔加3000个细胞,细胞毒性实验每孔加入6000个细胞即可。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定。
5、 37℃5%CO2继续培养或按照实验具体需要进行培养,一般培养6~24h。
6、 按照实验具体要求,给予0~20ul干预药物处理,37℃5%CO2继续培养至合适时间。
7、 弃培养液,每孔加入MTT solution和新鲜培养液,在细胞培养箱内继续孵育。
8、 弃培养液,每孔加入DMSO,置摇床上低速振荡,使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多,溶解的时间会长一些。
9、 在酶联免疫检测仪570nm测定各孔吸光度。
注意事项:
1、 MTT solution(5mg/ml)尽量减少反复冻融的次数,以免失效,当颜色变为灰绿色时,请勿使用。
2、 由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,应注意蒸发问题。
3、MTT solution在低温情况下会凝固,使用前请置于室温或20~25℃水浴至全部融解后使用。
4、 观察formazan是否完全溶解,亦可以借助光学显微镜观察。
5、 培养细胞时尽量细菌避免污染。
6、 应注意设立OD调零孔和对照。
7、 为了您的和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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