生物试剂 标准革兰氏染色液
价格 | ¥140/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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标准革兰氏染色液
简介:
革兰氏染色法是学中广泛使用的一种鉴别染色法,属于复染法,这种染色法是由一位丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰(Hans Christian Gram,1853年-1938年)于1884年所发明,最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。未经染色之,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察染色后与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
其染色原理是先经碱性染料结晶紫染色,而后经碘液进行媒染,之后用酒精脱色,在一定条件下有的媒染后的颜色不被脱去,有的可被脱去,因此可把分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G ),后者为革兰氏阴性菌(G-)。为方便进一步观察,脱色后可再用一种红色染料如碱性番红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被重新染上红色。有芽孢的杆菌和绝大多数的球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌、螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都呈现负反应。
另外,阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同pH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反。所以染色时的染色液pH和染色时间等条件要严格控制。例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应;pH很低时,则都可呈负反应。此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫-碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色。所以脱色时间、脱色方法也应严格控制。
BIOISCO 革兰氏染色液采用最经典的革兰染色配方,临床标本直接涂片,背景干净,胞核胞质对比强烈,胞内吞噬体清晰容易辨认,染色特征典型。该产品仅适用于科研实验,不可做他用。
组成:
产品名称 |
SM005-10ml×4 |
SM005-100ml×4 |
Storage |
试剂(A):结晶紫染色液 |
10ml |
100ml |
RT 避光 |
试剂(B):Gram碘液 |
10ml |
100ml |
RT |
试剂(C):脱色液 |
10ml |
100ml |
RT |
试剂(D):沙黄染色液 |
10ml |
100ml |
RT 避光 |
说明书 |
一份 |
保存条件:
室温避光保存,一年有效。
自备材料:
1、接种环或挑取的其他工具
2、酒精灯
3、载玻片
4、光学显微镜
操作步骤(仅供参考):
1、 涂片:取待检,于载玻片中央涂成薄层或者或在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与的水混合均匀,涂成一薄层。
2、 干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
3、 固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动,温度不宜过高,防止菌体蛋白变性,放置待凉后染色。也可以用甲醇或乙醇固定。
4、 初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。
5、 媒染:滴加Gram碘液,并覆盖载玻片,室温放置,水洗。
6、 脱色:滴加脱色液,摇动,直至流下的脱色液不出现紫色时为止,立即用水冲去脱色液, 终止反应。
7、 复染:滴加沙黄染色液染色,水洗。
8、 干燥。镜检:置油镜观察。
染色结果:
革兰氏阳性菌 |
蓝色至紫色 |
革兰氏阴性菌 |
红色 |
注意事项:
1、 涂片之前,应事先在背面做好圆圈标记,以便判断后续试验的位置。
2、 取时,应注意自我防护,拔或塞试管塞时,应将试管口通过火焰略加烧灼,最后将 接种环在火焰上烧灼灭菌。
3、 加热固定涂片时,应注意玻片勿太靠近火焰,一般要求玻片温度不超过60 ℃,以玻片 背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
4、 革兰氏染色的关键在于严格掌握脱色程度,脱色时间应根据经验判断。脱色过度,阳性 菌可被误染为阴性菌;脱色不够,阴性菌可被误染为阳性菌。
5、 待检培养时间会影响染色,阳性菌培养时间过长或已死亡或溶解,常呈阴性。
6、 为了您的和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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