伊势久生物过氧化氢酶（CAT）检测试剂盒（紫外吸收法）（分光光度50T/48S）微量法100T/96S 科研专用
| 价格 | ￥120/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂＂过氧化氢酶（CAT）检测试剂盒（紫外吸收法）（分光光度50T/48S）/t＂ |
| 名称 | 生化试剂＂过氧化氢酶（CAT）检测试剂盒（紫外吸收法）（分光光度50T/48S）/t＂ | 货号 | SR004 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | H2O2在240nm下有特征吸收峰，CAT能够分解H2O2，使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
过氧化氢酶（Catalase，CAT）试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H2O2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。
测定原理：
H2O2在240nm下有特征吸收峰，CAT能够分解H2O2，使反应溶液240nm下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT活性。
组成：
产品名称 |
SR004-50T/48S |
Storage |
提取液：液体 |
60ml |
4℃ |
工作液：液体 |
60ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
自备仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
粗酶液提取：
1、、细胞或组织样品的制备：
或培养细胞：先收集或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万或细胞加入1ml提取液），超声波破碎或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至240nm处，蒸馏水调零。
2、测定前将CAT检测工作液37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min。
3、在1ml石英比色皿中加入35μl样本和1ml工作液，混匀，室温下立即测定240nm下的初始吸光值A1和1min后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2
注意事项：出现负值怎么办？
检查反应过程是否产生气泡，气泡多说明酶活性太高，气泡影响产生了负值，可以将样本用提取液稀释10倍后再检测。如果稀释样本或反应体系没有产生气泡仍然出现较小的负值，说明该样本测不到该酶活。
CAT活性计算：
1、血清（浆）CAT活力的计算:
单位的定义：每毫升血清（浆）每分钟催化1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(nmol/min/ml)=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷V样÷T=678×ΔA
2、组织、或细胞中CAT活力计算：
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=678×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织每分钟催化1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W× V样÷V样总)÷T=678×ΔA÷W
（3）按或细胞密度计算：
单位的定义：每1万个或细胞每分钟催化1nmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
CAT(nmol/min/104 cell)＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷（500×V样÷V样总）÷T =1.356×ΔA
V反总：反应体系总体积，1.035×10-3L；ε：H2O2摩尔消光系数，4.36×104L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.035ml；V样总：加入提取液体积，1 ml；T：反应时间，1 min；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；500：细胞或总数，500万。
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