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伊势久生物 黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒(分光光度法 50T/48S) 分光光度法 100T/96S 科研专用

价格 260/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂"黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒(分光光度法 50T/48S)/t"
名称 生化试剂"黄嘌呤氧化酶(XOD)检测试剂盒(分光光度法 50T/48S)/t" 货号 OX003
包装类型 测定原理 XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒


黄嘌呤氧化酶(xanthione oxidase, XOD)试剂盒说明书

分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

XODEC 1.17.3.2)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心,肺,肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD大量释放到血清中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。

测定原理:

XOD催化黄嘌呤产生尿酸,尿酸在290nm下有特征吸收峰

试剂组成和配制:

产品名称

OX003-50T/48S

Storage

提取液:液体

60ml

4℃

试剂一:液体

60ml

4℃

试剂二:粉剂

4

4

说明书

一份

自备仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

粗酶液提取:

1、、细胞或组织样品的制备:

或培养细胞:先收集或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照或细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~10001的比例(建议500万或细胞加入1ml提取液),超声波破碎或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3、血清(浆)样品:直接检测。

测定步骤:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至290nm,蒸馏水调零。

2XOD检测工作液的配制:用时在每瓶试剂二中加入15ml试剂一,充分混匀,现配现用;

3、测定前将XOD检测工作液37℃(哺乳动物)25℃(其它物种)水浴10min

4、取1mlXOD检测工作液于1ml石英比色皿中,再加入35μL样本,混匀,室温下立即测定290nm下的初始吸光值A11min后的吸光值A2,计算ΔAA2-A1

XOD活性计算:

1、血清(浆)XOD计算:

单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。

XODnmol/min/ml)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷V÷T=2424×ΔA

2、组织、或细胞中XOD计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。

XODnmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr)÷T =2424×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。

XODnmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷W ×V÷V样总)÷T=2424×ΔA÷W

3)按或细胞密度计算:

单位的定义:每一万个或细胞每分钟催化产生1nmol 尿酸定义为一个酶活力单位。

XODnmol/min/104 cell=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷500×V÷V样总)÷T=4.848×ΔA

V反总:反应体系总体积,1.035×10-3 Lε:尿酸摩尔消光系数,1.22×104 L/ mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.05 mlV样总:加入提取液体积,1 mlT:反应时间,1 minW:样本质量,gCpr:样本蛋白质浓度,mg/ml500:细胞或总数,500万。

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