生化试剂"羟自由基能力测定试剂盒(微量法100T/96S) "
价格 | ¥650.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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纯度 | / | 规格 | AO008-100T/96S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 化试剂"羟自由基清除能力测定试剂盒(微量法100T/96S) " |
名称 | 化试剂"羟自由基清除能力测定试剂盒(微量法100T/96S) " |
羟自由基能力测定试剂盒说明书
微量法100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理:
H2O2/ Fe2+通过Fenton反应产生羟自由基,将邻二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化为Fe3+,导致536nm吸光度下降,样品对536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了样品羟自由基的能力。
组成:
产品名称
|
AO008-100T/96S
|
Storage
|
缓冲液:液体
|
100ml
|
4℃
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试剂一:液体
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12ml
|
4℃避光
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试剂二:液体
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6ml
|
4℃避光
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试剂三:液体
|
12ml
|
4℃
|
试剂四:液体
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6ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
|
自备仪器和用品:
恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。
样品的制备:
1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2.血清、果汁等液体样品可直接测定。
3.提取物(或者)可配制成一定浓度,如5 mg/ml。
测定操作表
1、酶标仪预热30min,调节波长至536nm。
2、工作液配制:使用之前按照每管试剂一:试剂二:试剂三=100:50:100(μl)的比例配制,用多少配多少,混匀。
3、在EP管中加入如下试剂
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空白管
|
对照管
|
测定管
|
工作液(μl)
|
250
|
250
|
250
|
混匀,防止局部颜色过浓
|
|||
样品(μl)
|
|
|
50
|
试剂四(μl)
|
|
50
|
50
|
H2O(μl)
|
100
|
50
|
|
混匀,37℃保温60min,8000g 25℃离心5min,吸取200μl于96孔板中测定536nm处吸光值,空白管、对照管和测定管的吸光值分别记为A空、A对和A测。
|
注意:空白管和对照管只需测定一次。
计算公式:
羟自由基率D% =(A测-A对)÷(A空-A对)×100%
A空、A对、A测:空白管、对照管和测定管的吸光值。
注意事项:
为了比较不同样品羟自由基能力,对于同一批样品必须加入等量的样品,血清、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积,提取物(或者)配制成同样浓度。
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