伊势久生物 二氢黄酮醇还原酶（DFR）检测试剂盒(分光光度法50T/24S) 微量法 100T/48S 科研专用
| 价格 | ￥1800/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 二氢黄酮醇还原酶（DFR）检测试剂盒(分光光度法50T/24S) 微量法 100T/48S |
| 名称 | 二氢黄酮醇还原酶（DFR）检测试剂盒(分光光度法50T/24S) 微量法 100T/48S | 货号 | AO019 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | 二氢黄酮醇还原酶作用于二氢槲皮素产生儿茶素，可与香草醛缩合形成红色化合物 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
二氢黄酮醇还原酶（Dihydro flavonol reductase，DFR）试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
二氢黄酮醇还原酶是类黄酮合成途径中的一个关键酶，在决定植物的花色、叶色、果色和其他经济器官的色泽及其营养品质方面起着重要作用。
测定原理：
二氢黄酮醇还原酶作用于二氢槲皮素产生儿茶素，可与香草醛缩合形成红色化合物，在500nm处有特征吸收峰。
组成：
产品名称 |
AO019-50T/24S |
Storage |
提取液：液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一：液体 |
30ml |
4℃ |
试剂二：液体 |
3ml |
4℃ |
试剂三：粉剂 |
1瓶 |
4℃ |
试剂四：液体 |
40ml×2 |
4℃避光 |
说明书 |
一份 |
|
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加5ml蒸馏水溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
自备仪器和用品：
研钵、低温离心机、震荡仪、氮吹仪、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、水浴锅、无水乙醇、乙酸乙酯。
酶液提取：
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。10000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.液体：直接检测。
测定操作表
对照管 |
测定管 |
|||
酶液（μl） |
200 |
200 |
||
试剂一（μl） |
700 |
600 |
||
试剂二（μl） |
100 |
|||
试剂三（μl） |
100 |
100 |
||
混匀，30℃反应30min |
||||
乙酸乙酯（μl） |
1000 |
1000 |
||
37℃震荡10min，取上层溶液，N2吹干 |
||||
无水乙醇（μl） |
500 |
500 |
||
充分震荡 |
||||
试剂四(μl) |
1500 |
1500 |
||
混匀，25℃静置10min，于1ml玻璃比色皿测定500nm处吸光值A。分别记为A对照管和A测定管，△A=A测定管-A对照管 |
||||
酶活性计算公式：
标准曲线：y=0.0184x 0.0002，R2=0.999
（1）按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在30℃，pH7.5条件下，每毫克蛋白每分钟分解二氢槲皮素产生1mmol儿茶素所需的酶量为一个酶活力单位。
DFR活性（mmol/min/mg prot）=（△A-0.0002）÷0.0184×V反总÷（V样×Cpr）÷T÷2
= 9.06×（△A-0.0002）÷Cpr
（2）按照样本质量计算
酶活性定义：在30℃，pH7.5条件下，每克组织每分钟分解二氢槲皮素产生1mmol儿茶素所需的酶量为一个酶活力单位。
DFR活性（mmol/min/g 鲜重）= （△A-0.0002）÷0.0184×V反总÷（V样×W÷V样总）÷T÷2
= 9.06×（△A-0.0002）÷W
（3）按液体体积计算
酶活性定义：在30℃，pH7.5条件下，每毫升液体每分钟分解二氢槲皮素产生1mmol儿茶素所需的酶量为一个酶活力单位。
DFR活性（mmol/min/ml）=（△A-0.0002）÷0.0184×V反总÷V样÷T÷2
= 9.06×（△A-0.0002）
V反总：反应总体积，1ml；V样：反应体系中样本体积，0.1ml；V样总：加入提取液体积，1ml；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；W，样本质量，g；T：反应时间，30min
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