伊势久生物 多胺氧化酶(PAO)检测试剂盒(分光光度法50T/48S) 微量法 100T/96S 科研专用
价格 | ¥900/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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所在地区:上海 上海市
主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 多胺氧化酶(PAO)检测试剂盒(分光光度法50T/48S) 微量法 100T/96S |
名称 | 多胺氧化酶(PAO)检测试剂盒(分光光度法50T/48S) 微量法 100T/96S | 货号 | AO030 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | PAO催化多胺氧化产生过氧化氢,在过氧化氢酶存在的条件下与底物显色 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
多胺氧化酶(Polyamine oxidase,PAO)试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
多胺氧化酶是催化生物体内多胺氧化的关键酶,通过调节体内多胺水平和生成物的浓度,参与各种植物体对逆境胁迫的反应和生长发育过程。
测定原理:
PAO催化多胺氧化产生过氧化氢,在过氧化氢酶存在的条件下与底物显色,在550nm下有特征吸收峰,通过测定吸光值增加速率来反映PAO活性。
组成:
产品名称 |
AO030-50T/48S |
Storage |
试剂一:液体 |
100ml |
4℃ |
试剂二:液体 |
6ml |
4℃ |
试剂三:液体 |
3ml |
4℃ |
试剂四:液体 |
3ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
自备仪器和用品:
分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取:
组织:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml试剂一)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心20min,取上清,置冰上待测。
、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
血清等液体:直接测定。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至550nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
试剂名称(μl) |
测定管 |
试剂一 |
700 |
试剂二 |
100 |
试剂三 |
50 |
样本 |
100 |
试剂四 |
50 |
迅速混匀,于550nm下测定初始吸光值A1与30min后吸光值A2。ΔA=A2-A1。 |
PAO活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每mg组织蛋白在每ml反应体系中每分钟A550变化0.002为一个酶活力单位。
PAO(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(V样×Cpr)÷0.002÷T =166.67×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
单位定义:每g组织在每ml反应体系中每分钟A550变化0.002为一个酶活力单位。
PAO(U/g 鲜重)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.002÷T =166.67×ΔA÷W
(3)按或细胞密度计算:
单位定义:每1万个或细胞在每ml反应体系中每分钟A550变化0.002为一个酶活力单位。
PAO(U/104cell)=ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.002÷T =0.333×ΔA
(4)按液体体积计算
单位的定义:每ml液体样本在每ml反应体系中每分钟A550变化0.002为一个酶活力单位。
PAO(U/ml)=ΔA×V反总÷V样÷0.002÷T =166.67×ΔA
V反总:反应体系总体积,1×10-3L;V样:加入样本体积,0.1 ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g;500:或细胞总数,500万。
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