肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒(分光光度法50T/48S)微量法100T/96S 科研专用
价格 | ¥900/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒(分光光度法50T/48S)微量法100 |
名称 | 肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒(分光光度法50T/48S)微量法100 | 货号 | AE013 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。
测定原理:
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP 生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。
组成:
产品名称 |
AE013-50T/48S |
Storage |
提取液: |
60ml |
4℃ |
试剂一:粉剂 |
1瓶 |
4℃避光 |
试剂二:液体 |
15ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
试剂一:粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加15ml蒸馏水溶解。
工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1混合。使用前37℃温育2min。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 ml石英比色皿和蒸馏水。
粗酶液提取:
1.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
2.血清样本:直接测定。
测定步骤:
1. 紫外分光光度计预热30min,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2.在1 ml石英比色皿中加入200μl样本和300μl蒸馏水,最后加入500μl工作液,立即混匀,37℃下测定初始吸光值A1与1min后的吸光值A2,ΔA=A2-A1。
CK活性计算公式
1、按组织蛋白含量计算
酶活定义:37℃,pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK活性(nmol/min / mg prot)=×V反总÷(V样×Cpr)= 804×△A÷Cpr
2、按组织样本质量计算:
酶活定义:37℃,pH7.0时,每克样品1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK活性(nmol/min /g 鲜重)=×V反总÷(V样÷V样总×W)= 804×△A÷W
3. 按血清计算:
酶活定义:37℃,pH7.0时,每升血清1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK活性(nmol/min /L)=×V反总÷V样= 804×△A
:NADPH摩尔消光系数,6220L /mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应体系总体积,1ml;V样:反应体系中样本体积,0.2ml;T,反应时间,1min;Cpr:样本蛋白浓度,mg/ml;W:样本质量,g
注意事项
1. 配制好的工作液4℃稳定7天,请配制后尽快使用。
2. 血清的CK不稳定,采集样本后尽快测定,4℃避光保存可稳定24h。
3. 样品蛋白质含量需要另外测定,可选用BCA蛋白含量测定试剂盒进行测定。
4. OD值大于0.5可用提取液适当稀释样品,并在计算公式中相应的改变稀释倍数。
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