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生化试剂尿素氮(BUN)试剂盒说明书

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基本参数

纯度 / 规格 NM022-100T/96S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂尿素氮(BUN)试剂盒说明书
名称 生化试剂尿素氮(BUN)试剂盒说明书

尿素氮(BUN)试剂盒说明书

微量法100T/96S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物,在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。

测定原理:

样本中尿素氮在氯化高铁一磷酸溶液中与二乙酰一肟和硫胺脲共煮,生成一种红色的二嗪化合物,其颜色的深浅与尿素氮含量成正比,采用二乙酰一肟法测定尿素氮含量。

组成:

产品名称

NM022-100T/96S

Storage

试剂一:液体

6ml

4℃避光

试剂二:液体

60ml

4℃避光

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

样品处理:

组织:按照质量(g):蒸馏水体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1ml蒸馏水)加入蒸馏水,匀浆后于25℃10000g离心10min,取上清待测。

细胞:按照细胞数量(104个):蒸馏水体积(ml )为500~10001的比例(建议500万细胞加入1ml蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃10000g离心10min,取上清置于冰上待测。

血清或其它液体:直接检测。

测定操作:

·

空白管

测定管

样品(μl

20

H2Oμl

20

试剂一(μl

50

50

试剂二(ml

500

500

混匀,沸水浴10min,冷却后,540nm下测定吸光值。A=A测定-A空白。空白管只要做一管。

尿素氮含量计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y =2.048x + 0.0229R2 = 0.9943x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

1、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算

尿素氮含量(mg/ml)= (A-0.0229)÷2.048=0.4882×(A-0.0229)

2、按照样本质量计算

尿素氮含量mg/g鲜重)= (A-0.0229)÷2.048×V样总÷W=0.4882×(A-0.0229)÷W

3、按照蛋白浓度计算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(A-0.0229) ÷Cpr

V样总:加入提取液体积,1 mlCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本质量,g

b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 1.024x + 0.0229R2= 0.9943x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

1、按照血清(浆)或者细胞培养液体积计算

尿素氮含量(mg/ml)= (A-0.0229)÷1.024=0.9766×(A-0.0229)

2、按照样本质量计算

尿素氮含量(mg/g鲜重)= (A-0.0229)÷1.024×V样总÷W=0.9766×(A-0.0229)÷W

3、按照蛋白浓度计算

尿素氮含量(mg/mg prot)= (A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.9776×(A-0.0229) ÷Cpr

V样总:加入提取液体积,1 mlCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本质量,g500:或细胞总数,500万。

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