生化试剂"山梨醇含量检测试剂盒 (微量法 100T/96S) "
| 价格 | ￥650.00/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | GMS017-100T/96S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂＂山梨醇含量检测试剂盒 (微量法 100T/96S) ＂ |
| 名称 | 生化试剂＂山梨醇含量检测试剂盒 (微量法 100T/96S) ＂ |
山梨醇含量试剂盒说明书
微量法 100管/96样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是糖运输形式之一，而且与生物抗逆性和食物风味密切相关。因此，在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含量变化。
测定原理：
山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物，在655nm波长有特征吸收峰。
组成：
产品名称
|
GMS017-100T/96S
|
Storage
|
试剂一：液体
|
3.5ml
|
4℃
|
试剂二：液体
|
3.5ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
|
|
自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
山梨醇的提取：
按照组织质量（g）：蒸馏水体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml蒸馏水），研磨成匀浆，95℃水浴10分钟（盖紧，以防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心10min，取上清液待测。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至655nm，蒸馏水调零。
2、加样表（在EP管中依次加入下列试剂）：
试剂（μl）
|
空白管
|
测定管
|
试剂一
|
35
|
35
|
试剂二
|
35
|
35
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样本
|
|
230
|
蒸馏水
|
230
|
|
混匀后室温静置15min，8000g，25℃离心10min，取200μl上清液至微量石英比色皿或96孔板中，测655nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管-A空白管。空白管只要做一管。
山梨醇含量计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.352x - 0.002；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值。
2、按照样品质量计算
山梨醇含量（mg /g 鲜重）＝[(ΔA＋0.002)÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=2.84×(ΔA＋0.002)÷W
3、按照样本蛋白浓度计算
山梨醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA＋0.002) ÷Cpr
V1：加入样本体积，0.23ml；V2：加入提取液体积，1 ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g
b.用96孔板测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.176x - 0.002；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值。
2、按照样品质量计算
山梨醇含量（mg /g 鲜重）＝[(ΔA＋0.002)÷0.176×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA＋0.002)÷W
3、按照样本蛋白浓度计算
山梨醇含量（mg /mg prot）＝[(ΔA＋0.002) ÷0.176×V1]÷(V1×Cpr)=5.68×(ΔA＋0.002) ÷Cpr
V1：加入样本体积，0.23ml；V2：加入提取液体积，1 ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g
注意：检测限为1μg/g鲜重或0.01μg /mg prot
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