伊势久生物 β-1 3葡聚糖酶（β-1 3-GA）检测试剂盒（分光光度法50T/24S）微量法100T/48S
| 价格 | ￥580/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | β-1 3葡聚糖酶（β-1 3-GA）检测试剂盒（分光光度法50T/24S）微量法100T/48S |
| 名称 | β-1 3葡聚糖酶（β-1 3-GA）检测试剂盒（分光光度法50T/24S）微量法100T/48S | 货号 | GMS024 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | β-1，3-GA水解昆布多糖，内切β-1，3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率来计算 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
β-1,3葡聚糖酶（β-1,3-glucanase，β-1,3-GA）试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
β-1,3-GA(EC3.2.1.73)主要存在植物中，催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下，可诱导细胞大量合成β-1,3-GA，因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
测定原理：
β-1,3-GA水解昆布多糖，内切β-1,3-葡萄糖苷键，产生还原末端，通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。
组成：
产品名称 |
GMS024-50T/24S |
Storage |
提取液：液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一：粉剂 |
1瓶 |
4℃ |
试剂二：液体 |
30ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入3ml蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂4℃保存；
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取：
1、或培养细胞：先收集或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万或细胞加入1ml提取液），超声波破碎或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至550nm，蒸馏水调零。
2、样本测定（在1.5mlEP管中依次加入下列试剂）：
试剂名称（μl） |
测定管 |
对照管 |
样本 |
100 |
100 |
蒸馏水 |
100 |
|
试剂一 |
100 |
充分混匀，放入37℃水浴60 min
试剂二 |
600 |
600 |
充分混匀，95℃水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却，550nm处记录各管吸光值A，如果吸光值大于2，可以用蒸馏水稀释后测定（计算公式乘以相应稀释倍数），ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。
β-1,3-GA活性计算：
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0958x -0.0192；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值。
2、血清（浆）β-1,3-GA活力的计算
β-1,3-GA(mg/h/ml)=[(ΔA 0.0192)÷0.0958×V1]÷V1=10.438×(ΔA 0.0192)
3、细胞、和组织中β-1,3-GA活力的计算
（1）按蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h/mg prot)=[(ΔA 0.0192)÷0.0958×V1]÷(V1×Cpr)=10.438×(ΔA 0.0192) ÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h /g 鲜重)=[(ΔA 0.0192)÷0.09585×V1]÷(W×V1÷V2)=10.438×(ΔA 0.0192) ÷W
(3) 按或细胞密度计算
单位的定义：每1万个或细胞每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h/104cell)=[(ΔA 0.0192)÷0.0958×V1]÷(500×V1÷V2)=0.0208×(ΔA 0.0192)
V1：加入反应体系中样本体积，0.1ml；V2：加入提取液体积，1ml；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g；500：或细胞总数，500万。
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