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生化试剂"β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)检测试剂盒(微量法 100T/96S) "

价格 980.00/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 GMS035-100T/96S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂"β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)检测试剂盒(微量法 100T/96S) "
名称 生化试剂"β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)检测试剂盒(微量法 100T/96S) "

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidaseβ-GD)试剂盒说明书

微量法 100/96

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

β-GD广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。该酶在肝细胞中含量较高。此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。

测定原理:

β-GD催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞,通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。

组成:

产品名称

GMS035-100T/96S

Storage

提取液:液体

100ml

4℃

试剂一:液体

2ml

4℃

试剂二:粉剂

1

-20℃

试剂三:液体

15ml

4℃

试剂:液体

10ml

4℃

说明书

一份

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2ml蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂仍-20℃保存;

试剂四:1μmol/ml标准储备液10ml4℃保存;

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

样品测定的前处理

按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2、样本测定

试剂名称(μl

加样孔

测定管

标准管

空白管

试剂一

20

20

20

试剂二

20

20

20

样本

10

1μmol/ml标准液

10

蒸馏水

10

混匀后,37℃反应30min

试剂三

150

150

150

混匀, 540nm下测定各管吸光值

注意:标准管和空白管只需测一次。

β-GD活性计算

1)按样本鲜重计算:

单位定义:每小时每g鲜重样品中催化产生 1μmol酚酞的量为一个活力单位。

β-GDμmol/h/g 鲜重)=(C标准管×V1)×A测定管-A空白管)÷A标准管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×A测定管-A空白管)÷A标准管-A空白管)÷W

2)按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每小时每mg组织蛋白催化产生 1μmol酚酞的量为一个活力单位。

β-GDμmol/h/mg prot=(C标准管×V1)×A测定管-A空白管)÷A标准管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=2×A测定管-A空白管)÷A标准管-A空白管)÷Cpr

C标准管:标准管浓度, 1μmol/mlV1:加入样本体积:0.01mlV2:加入提取液体积,1mlT:反应时间,0.5hCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本鲜重,g

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