生化试剂"总糖检测试剂盒(微量法 100T/96S) "
价格 | ¥580.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | GMS039-100T/96S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂"总糖检测试剂盒(微量法 100T/96S) " |
名称 | 生化试剂"总糖检测试剂盒(微量法 100T/96S) " |
总糖含量试剂盒说明书
微量法 100管/96样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。
测定原理:
总糖酸水解为还原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物,在过量的NaOH碱性溶液中呈桔红色,在540nm处有最大吸收峰,以此测定样品中的总糖含量。
组成:
产品名称
|
GMS039-100T/96S
|
Storage
|
试剂一:液体
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100ml
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4℃
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试剂二:液体
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100ml
|
4℃
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试剂三:液体
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5ml
|
4℃避光
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说明书
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一份
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自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。
样品中总糖的提取:
组织:称取约0.1g样品,加入1ml试剂一,1.5ml蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热30min,加入1ml试剂二,混匀,用蒸馏水定容至10ml,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
液体样本:取0.1ml样本,加入1ml试剂一,1.5ml蒸馏水,匀浆,95℃水浴中加热30min,加入1ml试剂二,8000g 25℃离心10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至95度。
3、加样表:
试剂(μl)
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空白管
|
测定管
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样本
|
|
8
|
蒸馏水
|
16
|
8
|
试剂三
|
12
|
12
|
混匀,置95度水浴中10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温
蒸馏水
|
172
|
172
|
混匀,540nm测定吸光值,ΔA=A测定管-A空白管
注意:1、空白管只要做一管。
2、如果ΔA大于2,需要将上清液用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。
总糖含量计算:
1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.3002x - 0.0507;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。
2、按样本鲜重计算:
总糖(mg /g鲜重)= [(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(W×V1÷V2)×稀释倍数=33.311×(ΔA+0.0507) ÷W×稀释倍数。
3、按样本蛋白浓度计算:
总糖(mg /mg prot)=[(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V1×Cpr) ×稀释倍数=3.3311×(ΔA+0.0507) ÷Cpr×稀释倍数。
V1:加入样本体积,0.008ml;V2:加入提取液体积,10ml; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本鲜重,g。
4、按照液体体积计算:
总糖(mg /ml)=[(ΔA+0.0507) ÷0.3002×V1]÷(V3×V1÷V2)×稀释倍数=116.59×(ΔA+0.0507)×稀释倍数。
V1:加入样本体积,0.008ml;V2:加入提取液体积,10ml/3.5ml; V3:液体样本,0.1ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本鲜重,g。
注意:检测限为1mg/g鲜重或10ng/mg prot
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