生化试剂内切-β-1 4-葡聚糖酶（Cx）检测试剂盒（微量法100T/48S） "
| 价格 | ￥600/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | GMS046-50T/24S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂＂内切-β-1，4-葡聚糖酶（Cx）检测试剂盒（微量法100T/48S）/t＂ |
| 名称 | 生化试剂＂内切-β-1，4-葡聚糖酶（Cx）检测试剂盒（微量法100T/48S）/t＂ |
内切-β-1，4-葡聚糖酶（Cx）活性测定试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
Cx（EC3.2.1.4）存在于、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，Cx主要作用于非晶态纤维素和水溶性纤维素衍生物，随机水解糖苷键，将其分解成葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖和其他寡聚体。
测定原理：
采用3,5－二硝基水杨酸法测定Cx催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。
组成：
产品名称 |
GMS047-100T/48S |
Storage |
提取液：液体 |
100ml |
4℃ |
试剂一：液体 |
6ml |
4℃ |
试剂二：液体 |
25ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
自备仪器和用品：
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品测定的准备：
1、或培养细胞：先收集或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万或细胞加入1ml提取液），超声波破碎或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、加样表（在EP管中依次加入下列试剂）：
试剂名称（μl） |
测定管 |
对照管 |
样本 |
10 |
10 |
试剂一 |
100 |
|
蒸馏水 |
100 |
混匀，37℃准确水浴2h
试剂二 |
200 |
200 |
混匀， 90℃水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却后，取200μl至微量石英比色皿或96孔板中，测540nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。
Cx活性计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值。
2、血清（浆）Cx活力的计算
单位的定义：每ml血清（浆）每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min/ml)=[1000×(ΔA 0.0673) ÷6.4078×V反总]÷V样÷T
=14.305×(ΔA 0.0673)
3、细胞、和组织中Cx活力的计算
（1）按照蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min/mg prot)=[ [1000×(ΔA 0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(V样×Cpr) ÷T
=14.305×(ΔA 0.0673) ÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min /g鲜重)=[1000×(ΔA 0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=14.305×(ΔA 0.0673) ÷W
（3）按或细胞密度计算
单位的定义：每1万个或细胞每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min /104cell)=[1000×(ΔA 0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(500×V样÷V样总) ÷T
=0.0286×(ΔA 0.0673)
1000：1mg/ml=1000ug/ml；V反总：反应体系总体积，0.11ml； V样：加入样本体积，0.01 ml；V样总：加入提取液体积，1 ml；T：反应时间，120 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；500：或细胞总数，500万。
b.用96孔板测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为y = 3.2039x - 0.0673；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值。
2、血清（浆）Cx活力的计算
单位的定义：每ml血清（浆）每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min/ml)=[1000×(ΔA 0.0673) ÷3.2039×V反总]÷V样÷T
=28.61×(ΔA 0.0673)
3、细胞、和组织中Cx活力的计算
（1）按照蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min/mg prot)=[ [1000×(ΔA 0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(V样×Cpr) ÷T
=28.61×(ΔA 0.0673) ÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min /g鲜重)=[1000×(ΔA 0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=28.61×(ΔA 0.0673) ÷W
（3）按或细胞密度计算
单位的定义：每1万个或细胞每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
Cx活力(μg/min /104cell)=[1000×(ΔA 0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(500×V样÷V样总) ÷T
=0.057×(ΔA 0.0673)
1000：1mg/ml=1000ug/ml；V反总：反应体系总体积，0.11ml； V样：加入样本体积，0.01 ml；V样总：加入提取液体积，1 ml；T：反应时间，120 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；500：或细胞总数，500万。
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