伊势久生物 β-木糖苷酶（β- xylosidase）检测试剂盒(分光光度法50T/24S)微量法100T/48S 科研
| 价格 | ￥880/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | β-木糖苷酶（β- xylosidase）检测试剂盒(分光光度法50T/24S)微量法100T/48 |
| 名称 | β-木糖苷酶（β- xylosidase）检测试剂盒(分光光度法50T/24S)微量法100T/48 | 货号 | GMS060 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | 测定405nm光吸收增加速率，可计算β-木糖苷酶活性 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
β-木糖苷酶（β- xylosidase）测定试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。
测定原理：
β-木糖苷酶催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚，对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰，测定405nm光吸收增加速率，可计算β-木糖苷酶活性。
组成：
产品名称 |
GMS061-50T/24S |
Storage |
提取液：液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一：液体 |
2ml |
4℃避光 |
试剂二：粉剂 |
20ml |
4℃ |
试剂三：原液 |
20ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
自备仪器和用品：
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿和蒸馏水。
粗酶液提取：
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃，离心20min，取上清待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.液体：直接检测。
测定操作表：
对照管 |
测定管 |
|
酶液（μl） |
200 |
200 |
试剂一（μl） |
50 |
|
试剂二（μl） |
400 |
350 |
混匀，45℃水浴20min |
||
试剂三（μl） |
400 |
400 |
混匀，静置5min，蒸馏水调零，405nm处测定吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。 |
||
β-木糖苷酶活性计算公式：
标准曲线：y=13.226x 0.0011，R2=0.9998；x为标准品浓度（μmol/ml），y为吸光值ΔA。
1、按蛋白浓度计算
酶活定义：45℃，pH7.4时每毫克蛋白1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷（V样×Cpr）÷T×1000
= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr
2、按样本质量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4时每克样品1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鲜重）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷（V样÷V样总×W）÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W
3. 按细胞数量计算：
酶活定义：45℃，pH7.4时每104个细胞1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷V样×V样总÷细胞数量（万个）÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
酶活定义：45℃，pH7.4时每毫升液体1min内催化产生1 nmol对硝基苯酚为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性（nmol/min/ ml）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷V样÷T×1000
=11.34×(ΔA-0.0011)
V样总：加入提取液体积，1ml； V反总：反应总体积，0.6ml；V样：反应中样品体积，0.2ml；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；W：样品质量，g；T：反应时间，20min；1000:1μmol/ml=1000nmol/ml
ΔA控制在0.01-2范围内，若ΔA大于2，可适当减小样本量。
标准曲线线性范围为：0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。
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