生化试剂葡萄糖-6-磷酸（6PG）检测试剂盒（100T/48S）
| 价格 | ￥1050.00/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | GC014-100T/96S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂葡萄糖-6-磷酸（6PG）检测试剂盒（100T/48S） |
| 名称 | 生化试剂葡萄糖-6-磷酸（6PG）检测试剂盒（100T/48S） |
葡萄糖-6-磷酸(Glucose 6-phosphate， 6P G)含量测定试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
6PG (Glucose-6-phosphate，葡萄糖-6-磷酸，又称6-磷酸葡萄糖)，是糖酵解和磷酸戊糖途径的中间产物，广泛存在于动植物体和微生物中。在糖酵解的第一步反应中，葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸，然后通过磷酸葡萄糖异构酶的催化形成果糖-6-磷酸，以继续糖酵解的其它步骤；而在戊糖磷酸途径中，葡萄糖-6-磷酸是其第一个底物，该过程也是生成NADPH的主要途径。此外，葡萄糖-6-磷酸也能转化形成糖原或淀粉而被储存起来。
测定原理：
6-磷酸葡萄糖脱氢酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH，NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8显橙黄色，在450 nm下测定吸光值。
组成：
产品名称
|
GC014-100T/48S
|
Storage
|
提取液：液体
|
60ml
|
4℃
|
试剂一：液体
|
12ml
|
4℃
|
试剂二：粉剂
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1瓶
|
-20℃
|
试剂三：液体
|
1.5ml
|
4℃避光
|
说明书
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一份
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自备仪器和用品：
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰、蒸馏水。
6PG提取：
1、或培养细胞：先收集或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照或细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万或细胞加入1ml提取液），超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）， 8000g，25℃离心10min，取上清待测。
2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆，8000g，25℃离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）等液体样品：直接测定。
测定步骤：
1、酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm。
2、试剂二的配制：临用前加入3ml水充分溶解待用，用不完的试剂分装后-20℃保存；
3、工作液的配制：临用前按照样本数量，按以下比例配制工作液
试剂名称（μl）
|
测定工作液
|
对照工作液
|
试剂一
|
100
|
100
|
试剂二
|
50
|
|
水
|
|
50
|
试剂三
|
10
|
10
|
样本测定
按下表在96孔板中加入如下试剂
试剂名称（μl）
|
测定管
|
对照管
|
样本
|
50
|
50
|
测定工作液
|
150
|
|
对照工作液
|
|
150
|
37℃避光孵育30min，450nm下测定吸光值A测定与A对照，△A=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。
6PG含量计算：
1、标准条件下测定回归方程为y = 3.8589x - 0.0016，R2= 0.997； x为6PG含量（μmol/ml），y为吸光值。
2、按照血清（浆）体积计算
6PG含量（nmol/ml）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷V1×1000
=259.1×(△A+0.0016)
3、按照蛋白浓度计算
6PG含量（nmol/mg prot）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(V1×Cpr)×1000
=259.1×(△A+0.0016) ÷Cpr
4、按照样品质量计算
6PG含量（nmol/g鲜重）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(W ×V1÷V2）×1000
=259.1×(△A+0.0016) ÷W
3、按照或细胞密度计算
6PG含量（nmol/104cell）= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷（500×V1÷V2）×1000
=0.518×(△A+0.0016)
V1：加入反应体系中样本体积，0.05ml；V2：加入提取液体积，1 ml； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；500：或细胞总数，500万；1000，μmol到nmol的换算系数。
上海跃腾生物技术有限公司
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