伊势久生物 线粒体分离和提取检测试剂盒(分光光度法50T/48S)科研专用
价格 | ¥285/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂线粒体分离和提取检测试剂盒(分光光度法50T/48S) |
名称 | 生化试剂线粒体分离和提取检测试剂盒(分光光度法50T/48S) | 货号 | OP022 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | 利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
线粒体分离和线粒体酶提取试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
线粒体是半自主性细胞器,不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所,为细胞的活动提供能量,而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此,准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。
测定原理:
利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体;利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶。
试剂的组成和配制:
产品名称 |
OP022-50T/48S |
Storage |
试剂一:液体 |
50ml |
-20℃ |
试剂二:液体 |
10ml |
-20℃ |
试剂三:液体 |
10ml |
-20℃ |
试剂四:液体 |
1ml |
-20℃ |
说明书 |
一份 |
需自备的仪器和用品:
超声波破碎仪、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
提取步骤:
1、准确称取约0.1g组织或收集约500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂四,用冰浴匀浆器或研钵研磨。
2、4 ℃ 600 g离心5min。
3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,4 ℃ 11000 g离心10min。
4、上清液即胞浆提取物,可用于研究线粒体蛋白向胞浆的释放。
5、沉淀为完整线粒体。含有完整的内膜和外膜,并具有线粒体的生理功能。可用于线粒体的生理功能等方面的研究。
6、在沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂四,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),可用于线粒体酶活性测定。
7、在沉淀中加入200uL试剂三和2uL 试剂四,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),可用于线粒体蛋白浓度测定。
注意事项
1、 分离线粒体和提取线粒体蛋白质的所有步骤均需在冰上或4℃进行,所用溶液需冰浴或4℃预冷。
2、 通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g和11,000g,如果希望纯度更高,但对线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可以采用1000g和3500g。
3、 为了您的和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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