生化试剂淀粉分支酶检测试剂盒(微量法 100T/48S)
价格 | ¥1650.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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纯度 | / | 规格 | SA008-100T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂淀粉分支酶检测试剂盒(微量法 100T/48S) |
名称 | 生化试剂淀粉分支酶检测试剂盒(微量法 100T/48S) |
淀粉分支酶(Starch branching enzyme,SBE)试剂盒
(微量法100T/48S)
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
测定原理:
直链淀粉和碘结合后在660nm有特征光吸收,SBE使直链淀粉含量减少,从而降低了淀粉-碘复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
组成:
组分名称
|
SA008-100T/48S
|
Storage
|
提取液:液体
|
100ml
|
4℃
|
试剂一:液体
|
10ml
|
4℃
|
试剂二:粉剂
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1支
|
4℃
|
试剂三:液体
|
13ml
|
4℃
|
试剂四:液体
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1ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
|
试剂二:粉剂×1支,4℃保存;临用前每支加入1ml蒸馏水,95℃沸水浴充分溶解后备用;用不完的试剂4℃保存;
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水
粗酶液提取:
按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。
2、加样表
试剂名称(μl)
|
对照管
|
测定管
|
95℃水浴1min后灭活的粗酶液
|
65
|
|
粗酶液
|
|
65
|
试剂一
|
85
|
85
|
试剂二
|
10
|
10
|
混匀,37℃准确保温20 min,置95℃水浴中5 min(盖紧,防止水分散失),冷却
试剂三
|
130
|
130
|
试剂四
|
10
|
10
|
混匀,室温静置10min,取200uL至微量石英比色皿或96孔板中,660nm处读取各管吸光值。每个测定管需设个一个对照管。
注意:
1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。
2、试剂二如有沉淀,务必沸水浴溶解后使用
SBE活力单位的计算:
1、按照蛋白浓度计算
单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性(U/mg prot)=(A对照管-A测定管)/A对照管÷Cpr×100
2、按照样本鲜重计算
单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在反应体系中每降低1%碘蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性(U/g 鲜重)=(A对照管-A测定管)/A对照管÷(W÷V样总)×100
V样总:提取液总体积,1ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样品质量,g。
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