生化试剂支链淀粉检测试剂盒(微量法 100T/96S)
价格 | ¥1600.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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所在地区:上海 上海市
主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | SA018-100T/96S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂支链淀粉检测试剂盒(微量法 100T/96S) |
名称 | 生化试剂支链淀粉检测试剂盒(微量法 100T/96S) |
支链淀粉含量试剂盒
(微量法100T/96S)
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
支链淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响,对于不同比例直、支链淀粉的淀粉的研究具有重要的意义。
测定原理:
利用80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。
组成:
组分名称
|
SA018-100T/96S
|
Storage
|
试剂一:液体
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100ml
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4℃
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试剂二:乙醚(自备)
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100ml
|
4℃
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试剂三:液体
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100ml
|
4℃
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试剂四:液体
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2ml
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4℃
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试剂五:液体
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300μl
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4℃
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说明书
|
一份
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自备仪器和用品:
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰、乙醚和蒸馏水。
淀粉提取:
称取0.01~0.02g烘干样本(建议称取约0.01g)于研钵中研碎,加入1ml试剂一,充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1ml试剂二(乙醚)振荡5min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1ml试剂三充分溶解,90℃水浴10min,冷却后待测。
测定步骤:
分光光度计或酶标仪预热30min以上,蒸馏水调零。
测定管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL样本, 14uL试剂四,120uL蒸馏水,2uL试剂五,44uL蒸馏水,混匀,分别测定550和743nm处吸光值,ΔA测定=A550-A743。
空白管:在96孔板或微量石英比色皿中依次加入20uL试剂三, 14uL试剂四,120uL蒸馏水,2uL试剂五,44uL蒸馏水,混匀,分别测定550和743nm处吸光值,ΔA空白=A550-A743。
支链淀粉含量计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y=0.1214x+0.0076;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。
1、按照蛋白浓度计算
支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA测定-ΔA空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×(ΔA测定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干重计算
支链淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA测定-ΔA空白-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×(ΔA测定-ΔA空白-0.0076) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.02ml;V2:加入提取液体积,1 ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y= 0.0607x+0.0076;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。
1、按照蛋白浓度计算
支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA测定-ΔA空白-0.0076)×V1]÷0.0607 ÷(V1×Cpr)=16.47×(ΔA测定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr
2、按样本干重计算
支链淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA测定-ΔA空白-0.0076)×V1] ÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47×(ΔA测定-ΔA空白-0.0076) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.02ml;V2:加入提取液体积,1 ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量,g
检测限为10mg/g干重或0.1mg/mgprot。
上海跃腾生物技术有限公司
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